_叶片中烯脂酰_CoA还原酶基因PsECR的筛选及其启动子的克隆表达分析.pdfVIP

果树 学报 ， （ ） 2014 31 4 : 574～582 Journal of Fruit Science DOI: 10.13925/ki.gsxb 叶片中烯脂酰-CoA 还原酶基因PsECR 的 筛选及其启动子的克隆表达分析 ， ， ， ， 赵 利1 2 ，陈桂信1 2* ，王玉珍1 2 ，吕恃衡1 ，潘东明1 2 ，姜翠翠3 1 州 2 州 （ 福建农林大学园艺学院，福 350002 ； 福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所，福 350002 ； 3 福建省农业科学院果树研究所，福州 350013 ） 摘 要： 的 讨 分子机制及其启动子的克隆和功能，为其抗病机理研究和基 【 目 】探 ECR 基因在调控蜡质形成过程中 【方 】从 个不同生长发育时期叶片的均一化全长 文 因表达调控模式研究奠定基础。 法 已构建好的 5 cDNA 库中分离 得到了一个烯脂酰-CoA 还原酶（ECR ）基因，命名为PsECR ，然后，根据其序列设计引物，采用 Genome Walking 方法 基 中 基因上游的启动子序列，命 。 【结 】 序列分析结果表明， 从 因组DNA 分离获得 PsECR 名为PsECRp 果 PsECR 该基因的 全长为 717 bp ， 非翻译区长 bp ， ’非翻译区长 bp ，开放阅读框（ ）为 bp ，编码 cDNA 1 5′ 447 3 337 ORF 933 311 个氨基酸。 通过蛋白质序列对比发现PsECR 与蔷薇科植物苹果的ECR 蛋白质同源性达到93% ，荧光定量PCR 分析 表明， 在幼叶、老叶中的表达量相对其他 个时期明显最低，而叶芽、展开叶、成熟叶中表达量处于同一水平。 PsECR 3 将得到的PsECRp 序列用在线软件 plantcare 和plant 分析表明，该序列除含有启动基本元件，如TATA-Box 、CAAT- Box 外，还含有 2 个防御相关元件（MYB1LEPR ）、2 个抗病响应元件（BIHD10S ）、1 个病原菌应答元件（W-Box ）、1 个 真菌诱导反应元件（Box-w1 ）、2 个茉莉酸甲酯响应元件（CGTCA-motif ）、1 个响应逆境胁迫富TC 的重复序列（TC- 响应元件。 论 选得到了 因全长序列，对该基因在叶片的不同生长发育过程中的动态 rich repeats ）等 【结 】筛 PsECR 基 表达分析显示，