猕猴桃SRAP-PCR体系的建立及品种资源亲缘关系研究.pdfVIP

园艺学报，2016 ，43 (2) ：337 –346. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0331；http ：//www. ahs. ac. cn 337 猕猴桃 SRAP-PCR 体系的建立及品种资源亲缘 关系研究 1,3,* 1,3 1,2,3 井赵斌 ，徐 明 ，雷玉山 1 2 3 （ 陕西省农村科技开发中心，西安 710054 ； 陕西省西安猕猴桃试验站，西安 710054 ； 陕西省汉中猕猴桃研究 所，陕西汉中 723500 ） 摘 要：以猕猴桃属（Actinidia Lindl. ）不同种幼嫩叶片为材料，建立了基因组DNA 提取的改良 SDS 法，在此基础上采用正交试验设计和单因素分析相结合的方法，建立了适合猕猴桃 SRAP 分析的优化体 系，即在 20 μL 总的反应体系中包括：DNA （40 ng · μL-1 ）1 μL 、Taq DNA 酶（5 U · μL-1 ）0.2 μL 、dNTPs （2.5 mmol · L-1) 1.4 μL 、引物（10 μmol · L-1 ）各 1.5 μL 、Mg2+ （25 mmol · L-1 ）2.0 μL 、10× 缓冲液 2.5 μL 、 ddH2O 9.9 μL 。利用该体系对32 份猕猴桃品种资源进行遗传多样性和亲缘关系分析，结果表明 14 条引物 共扩增出 275 个多态性位点，多态性百分率为 100%，SRAP 可以作为猕猴桃资源亲缘关系研究的有效标 记；在遗传相似系数 0.73 水平处，供试材料可区分为 4 组，分别是中华猕猴桃、美味猕猴桃、黑蕊猕猴 桃和毛花猕猴桃组。聚类结果表明中华猕猴桃与美味猕猴桃有着非常近的亲缘关系，毛花猕猴桃与中华 猕猴桃之间的亲缘关系较远，黑蕊猕猴桃与美味猕猴桃之间亲缘关系可能较近。 关键词：猕猴桃；SRAP 标记；体系建立；亲缘关系 中图分类号：S 663.4 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2016 ）02-0337-10 Construction and Application of SRAP-PCR System to Analyze Genetic Relationship of Actinidia JING Zhao-bin1,3,*，XU Ming1,3，and LEI Yu-shan1,2,3 1 2 （Shaanxi Rural Science and Technology Development Center ，Xi’an 710054，China；Xi’an Kiwifruit Experiment Station 3 of Shaanxi Province ，Xi’an 710054 ，China； Hanzhong Kiwifruit Research Institute of Shaanxi Province ，Hanzhong ，Shaanxi 723500，China） Abstract ：An improved SDS method ，suitable for extracting genomic DNA of Actinidia young leaves，was established. Based on this result ，an orthogonal design and a factor analysis method were combined to opt