综合性血液病分子诊断体系2.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * We Promote the Applications Innovations of Molecular Hematology 综合性血液病分子诊断体系的建立和实践 刘红星 lhongxing@ 陆道培血液?肿瘤中心 分子诊断室 我们一直在进步 更强的团队力量 更好的硬件支持 更多的新项目 优化的项目设置 血液病诊断和治疗已经进入分子生物学时代 分类标准： 1985 FAB WHO 2001 2008 1960年 1973年 1985年 1995年 1997年 2001年 2008年 2011年 鉴定Ph染色体 鉴定t(9;22)易位 鉴定BCR-ABL1 STI571临床试验 FDA批准Imatinib BCR-ABL1定量标准化会议 1985~1988 年Mullis 等发明PCR技术 HGP，1985年提出，1990年启动 2000年，人类基因组草图完成 2003年，HGP完成，后基因组时代开始 第二代测序技术 荧光定量PCR技术 第一台毛细管基因测序仪 生物信息： 检测技术： 第二代测序临床应用 定量PCR临床应用 定性PCR临床应用 基因组学的研究推动疾病分子标记的发现和临床应用 97.3%的AML患者携带其中一种或以上的基因突变 预后差：FLT3-ITD、MLL-PTD、ASXL1、PHF6 预后好：CEBPA、IDH2、NPM1伴IDH1/IDH2突变 伴DNMT3A、NPM1突变、MLL易位患者，采用大剂量的柔红霉素治疗可提高生存率 Prognostic Relevance of Integrated Genetic Profiling in Acute Myeloid Leukemia Jay P. Patel, et al., N Engl J Med 2012;366:1079-89 肿瘤的突变组 每一个肿瘤的发生都是一个基因团伙在犯罪 每一个肿瘤基因组都是不同的基因突变的组合 白血病分子诊断 只根据一种融合基因分类的患者仍有异质性 AML1-ETO VS. AML1-ETO+KIT突变 只检测一种突变也是不够的 NPM1 VS. FLT3 VS. NPM1+FLT3 新的突变出现提前可能预示临床进展 急变、耐药等 对肿瘤突变组的全面了解有助于指导个性化治疗 分子诊断的发展趋势及挑战 Lucy A. Godley, DOI:0.1056/NEJMe1200409 分子诊断临床应用遇到的问题 临床医师如何认识新的项目？ 实验室如果向临床医师推荐新的项目？ 如何提高突变的检测灵敏度？ 如何降低检测费用？提高发现分子标记的速度？ 综合性血液病分子诊断体系 融合基因筛查 定量监测MRD 耐药、疾病进展监测 基因突变筛查 定量监测MRD 原癌基因表达谱定量监测 个体差异相关的药物代谢、药物不良反应等 其它项目：移植后嵌合状态；IG、TCR克隆性；BCR-ABL1变异分析等 孟德尔遗传病：先天性免疫缺陷、范可尼贫血等 “活在当下”与“追本溯源” 用初治时的石蜡、形态涂片标本进行基因突变筛查 从实验方案和流程设计上加快报告速度 新技术的应用和技术创新 融合基因和基因突变筛查 → 针对性监测 降低总体检测费用，争取宝贵时间 内容将不断增加，价格一般不再调整 综合性血液病分子诊断体系 高通量基因测序的应用 降低单位检测成本 肿瘤“突变组”分析变为可能 深度测序 – 突变MRD监测 IG、TCR免疫组库分析 白血病融合基因和基因突变检测 V2.3版31种融合基因筛查 新的融合基因筛查项目 AML融合基因筛查（13种） AML1-EAP(1)；AML1-ETO(1)；AML1-MDS1(2)；CBFB-MYH11(8)；DEK-CAN(1)；NPM-ALK(1)；NPM-MLF1(1)；NPM-RARA(2)；PLZF-RARA(2)；PML-RARA(5)；SET-CAN(1)；TEL-ABL1(2)；TLS-ERG(5) ALL融合基因筛查（10种） BCR-ABL1(6)；E2A-HLF(3)；E2A-PBX1(2)；NPM-ALK(1)；NPM-MLF1(1)；SET-CAN(1)；SIL-TAL1(1)；TEL-ABL1(2)；TEL-AML1(2)；TLS-ERG(5) MPN融合基因筛查（23种） AML1-MDS1(2)；BCR-ABL1(6)；FIP1L1-PDGFRA(5) ；TEL-ABL1(2)；18种PDGFRB fusion gene；TLS-ERG(5) MLL融合基因筛查(11种)