ABO血型鉴定-玻片法.ppt

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ABO血型鉴定-玻片法

目录 一.实验目的 二.实验原理及相关知识 三.实验材料 四.实验步骤 五.注意事项 六.实验结果 七.实验小结 一.实验目的 (1)学习辨别ABO血型的方法 (2) 掌握ABO血型鉴定的原理 (3) 认识血型鉴定在输血中的重要性 二.实验原理 在ABO血型系统中,红细胞膜有A和(或)B两种凝集原,而血清中有抗A和抗B两种抗体。A凝集原加抗A抗体或B凝集原加抗B抗体会出现红细胞凝集现象,从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B凝集原以判断血型。 三.实验材料 一次性采血针 玻片 消毒牙签 试管及吸管 标准抗A和抗B血清 毛细吸管及胶头 75%乙醇 消毒棉签 记号笔 材料筐 四.实验步骤 2、5%的受检者红细胞悬液配制:于小试管中加入NS 5滴,用75%酒精消毒指尖或耳垂,用一次性采血针迅速刺破消毒部位的皮肤,毛细吸管取血加入小试管中,混匀,即得约5%红细胞悬液。 3.取清洁玻片一块,两端分别标明“抗A” 和“抗B” 。 4.在相应玻片上的中央处分别滴加标准抗A 和抗B血清各一滴。 5.用滴管吸取红细胞悬液,分别各滴一滴 于玻片两端的血清上,注意勿使滴管与血 清相接触。 6.竹签两头分别混合,搅匀。 7.观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块为阳性。先用肉眼看有无凝集现象,肉眼不易分辨时,则在低倍显微镜下观察,如有凝集反应,可见红细胞聚集成团。 8. 判断血型 根据被试者红细胞是否被A,B型标准血清所凝集,判断血型。 五.实验结果判断 六、实验结果 记录本实验的结果 八.注意事项 1、玻片、试管都要标记!!! 2、A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清。 3、所用玻片、试管实验前必须清洗干净,以免出现假凝集现象。 4、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面,牙签一端混匀一侧就不能去接触另一侧。 5、一般先加血清,然后再加红细胞悬液,便于核实是否漏加血清。试验用血清和试剂红细胞都应标准化。 6、要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应注意观察凝集强度,有助于A、B亚型的发现,观察后立即记录观察结果。 * * 含某种凝集原的红细胞 + 含相应凝集素的血清 红细胞凝集反应 (agglutination) 1.实验原理 血型不相容的两人血液 混合,则红细胞可凝集成簇 抗A 抗B 1、生理盐水配制:称取0.9gNaCl加入少量ddH2O使之完全溶解,再用ddH2O定容至100ml即可。 抗A型标准血清 抗B型标准血清 B型 抗A型标准血清 抗B型标准血清 A型 抗A型标准血清 抗B型标准血清 抗A型标准血清 抗B型标准血清 O型 AB型 示 意 图 七、临床应用 *

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