第十二章 免疫学检测技术.ppt

第二节 抗原抗体检测技术 沉淀反应 免疫电泳（Immunoelectrophoresis) 第二节 抗原抗体检测技术 沉淀反应 免疫电泳（Immunoelectrophoresis) 第二节 抗原抗体检测技术 沉淀反应 免疫电泳（Immunoelectrophoresis) 第二节 抗原抗体检测技术 沉淀反应 中和反应（Neutralization） 第二节 抗原抗体检测技术 沉淀反应 中和反应（Neutralization） 毒素、酶、激素或病毒等与其相应的抗体结合后，导致生物活性的丧失。 鸡胚中和试验 细胞中和试验 动物中和试验 第二节 抗原抗体检测技术 免疫标记 免疫标记技术 第二节 抗原抗体检测技术 免疫标记 免疫标记技术 用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体（或抗原）进行抗原-抗体反应。标记物质与抗体（或抗原）的化学连接未改变抗体（或抗原）的免疫学特性，同时标记物的性质依然存在，因而极大的提高了反应的灵敏度，可以对微量物质进行定量、定性或定位检测。 第二节 抗原抗体检测技术 免疫标记 免疫标记技术 免疫标记技术主要有三种基本类型： 免疫荧光技术 免疫酶技术 同位素标记技术。 第二节 抗原抗体检测技术 免疫标记 免疫荧光显微技术(Immunofluorescence Technique) * 免疫学检测技术 第十二章 Immunological Methods 第一节 概述 第一节 概 述 第一节 概述 免疫学检测技术是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞、细胞因子及化学成分等的实验手段。 免疫学检测技术的应用极为广泛。 第一节 概述 免疫学检测技术的（主要）应用： 疾病诊断 检测抗原（病原）、抗体 免疫功能评价 检测免疫细胞活性、细胞因子及其他免疫分子 蛋白及其它微量物质的检测 重组蛋白、药残、农药、激素、酶等 第一节 概述 免疫学检测的理论基础（基本原理）： 抗原与抗体的特异性结合 用已知的抗原（抗体）可检测未知的抗体（抗原） 免疫细胞和分子的免疫学功能和生物学活性 第二节 抗原抗体检测技术 第二节 抗原抗体检测技术 第二节 抗原抗体检测技术 一、抗原抗体检测技术的理论基础 抗原具有抗原性（免疫反应性），可与相应的抗体在体外发生特异性结合，并在一定条件下出现可见反应现象。故可用已知的抗原（或抗体）检测未知的抗体（或抗原）。因抗体主要存在与血清中，故又称为血清学反应。 第二节 抗原抗体检测技术 二、抗原抗体反应的特点 特异性：是抗原抗体反应最基本的特点 可逆性：非共价可逆结合 比例性：是否出现可见现象与抗原抗体比例相关 第二节 抗原抗体检测技术 前带 后带 第二节 抗原抗体检测技术 第二节 抗原抗体检测技术 三、抗原-抗体反应的影响因素 电解质：常应用0.85%的氯化钠作为稀释液，以供给适应浓度的电解质。 温度：常在37度水浴或孵育箱中进行。 酸碱度：适应的酸碱度为pH6~8。 第二节 抗原抗体检测技术 四、抗原抗体反应（血清学）主要方法 凝集反应 沉淀反应 免疫标记技术 中和反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 凝集反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 凝集反应 颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合，在有电解质存在时，比例适当，形成肉眼可见的凝集团块。 凝集反应可分为直接凝集、间接凝集等 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 1.直接凝集反应 是指颗粒性抗原（凝集原）与相应的抗体（凝集素）直接结合所呈现的凝集现象。 如红细胞ABO血型的测定，细菌凝集试验。 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 2.间接凝集反应 是可溶性抗原或抗体吸附于与免疫无关的微球载体上，形成致敏颗粒，与相应的抗体或抗原在电解质存在的条件下进行反应，出现凝集。 第二节 抗原抗体检测技术 凝集反应 正向间接凝集：用抗原致敏，测抗体 反向间接凝集：用抗体致敏，测抗原 第二节 抗原抗体检测技术 沉淀反应 沉淀反应 第二节 抗原抗体检测技术 沉淀反应 沉淀反应（precipetation） 是指可溶性抗原与相应抗体在合适的电解质存在下，出现肉眼可见的沉淀现象。 可分为