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广水市疟原虫镜检培训 疟原虫的种类 人体疟原虫的宿主 疟原虫的生活史 疟原虫的基本结构 薄血膜上间日疟原虫的环状体 薄血膜上间日疟原虫的滋养体 薄血膜上间日疟原虫的成熟裂殖体 薄血膜上间日疟原虫的配子体 恶性疟原虫的环状体 较小，约占红细胞的直径的1/6，核1个或2个，胞质纤细，色素无 恶性疟原虫的配子体 ♀雌配子体较大，新月形，两端尖锐；核1个，较小，深红色，位于中央；胞质深蓝色；色素黑褐色，紧密分布于核周围。 ♂雄配子体较大，腊肠形，两端钝圆，核1个，较大，淡红色，位于中央；胞质浅蓝色或淡红色；色素黑褐色，松散分布于核周围。 血检的对象 疟疾病人 疑似疟疾病人 发热原因不明 疑似感冒及其他 流行病学 传染源：现症病人和带虫者的末梢血液在存在配子体时即具有传染性，成为传染源. 传疟媒介：为按蚊，我国较重要的传疟媒介有中华按蚊、嗜人按蚊、微小按蚊和大劣按蚊四种。 易感性和免疫力：一般人都是易感的。疟疾的免疫只是带虫免疫。 自然因素：地形、气温、湿度、雨量 社会因素：社会经济水平、文化教育和科学技术的发展程度以及人群的行为因素等。 疟疾的诊断 原则：根据流行病学史、临床表现以及实验室检查结果，予以诊断。 依据：1.流行病学史 2.临床表现 3.假定性治疗 4.实验室检查 标准：1.带虫者 2.疑似病例 3.临床诊断病例 4.确诊病例 实验室检测 病原学检测 厚薄血片镜检 免疫学检测 1.抗原检测（ELISA） 2.抗体检测（IFA） 分子生物学检测 （PCR） 厚薄血膜的制作 取玻片2张，1张做载玻片，1张作推片（边缘光滑的一面），用右手大拇指和食指夹持推片侧缘中部，用推片的左下角刮取血液4～5μl，再用该端中部刮取血液1～1.5μl。 将左下角的血滴涂于载片的中央偏右处，由里向外一个方向旋转2～4圈，涂成直径为0.8～1cm的圆形厚血膜（厚血膜的厚度以一个油镜视野内可见到5～10个白细胞为宜）。用干棉球擦净玻片角上的血渍，然后将推片下缘平抵载玻片的中线，当血液在载玻片与推片之间向两侧扩展至约2cm宽时，使两玻片保持25°～35°角，从右向左迅速向前推成舌状薄血膜，厚度应以红细胞之间互相接触而不相互重叠为佳 厚薄血膜的染色 薄血膜固定 染色前薄血膜要用甲醇或无水乙醇固定。 厚血膜溶血 染色前用蒸馏水或清水溶血，新鲜血膜可不溶血直接染色，注意一定要待血膜干燥透彻才能染色，不然血膜会脱落。 染色 染液的稀释和染色冲洗用水常用的是中性的蒸馏水或经煮沸过滤的冷开水，为了使血膜着色较好，应用pH7.2水效果最佳。 单片染色：单张血膜染色可取蒸馏水或缓冲液1ml加入吉氏染液1滴，混合均匀后，滴在厚、薄血膜上，染色20～30分钟，然后水洗、晾干。 多片染色：采用吉氏染液成批血膜染色时，将血膜朝一个方向插入染色缸中，或每对玻片血膜朝外，背靠背插入染色缸中，倒入新配的3％吉氏染液(3ml吉氏原液与97ml蒸馏水缓冲液混匀），浸没厚薄血膜，染色30分钟后，向染色缸中注入缓冲液或自来水，直到溢出，除掉染液表面上的浮渣，将染色缸中残余的染液倾出，加入新水，反复冲洗2～3次，然后取出玻片，将血膜朝下插在晾片板上干燥。 重新染色法： 褪色或染色效果不佳时，可先用二甲苯反复洗去血膜上的油迹，再用75％酒精滴在厚、薄血膜上，用水反复冲洗数次，至厚血膜不见蓝色为止。取1ml蒸馏水加入1滴吉氏染液，混匀后滴在厚、薄血膜上，染色1～4小时（根据血片存放时间而定)。清水冲洗2～3分钟，加1～2滴75％酒精于血膜上，1～2秒钟后用水冲洗，待干。 影响血膜染色质量的因素 血片染色好坏，除与玻片的清洁程度、血膜制作的质量和染色技术等有关外，还与下列因素有关: 1、染剂和溶剂的质量 2、染液的新旧 3、染液的稀释浓度 4、染色时间 5、稀释和冲洗用水 6、冲洗方法 厚血膜的疟原虫的计数 Thank you! * * 1.间日疟原虫(Pv) 2.恶性疟原虫(Pf) 3.三日疟原虫(Pm) 4.蛋形疟原虫(Po) 中间宿主：人体 终宿主：按蚊 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience （一）在人体内的发育 1.红细胞外期 2.红细胞内期 （二）在蚊体内的发育 1.配子生殖 2.孢子生殖 疟原虫的生活史图片→ 经吉氏染色后的形态 1.核 呈红色，圆形或不规则形的颗粒状 2.胞质 呈蓝色或深蓝色 3.色素 黄褐色或深褐色 较大，约占红细胞的直径的1/3，核1个胞质较薄，色素无 较大，核1个，胞质阿米巴样，