MALDI-TOF质谱介绍幻灯片.ppt

质谱的基本结构 飞行时间质谱系列全方位服务于尖端科学研究 生物质谱用于蛋白鉴定的基本原理 二级质谱用于多肽测序 二级质谱用于蛋白鉴定的方法 MALDI Mechanism Polyester resin Polyurethane Epoxy resin GPC-MALDI-TOF-MS Butoxyl modified DDPA * Matrix Assisted Laser Desorption Ionization (MALDI) Time of Flight (TOF)-Mass Spectrometer (MS) 基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪 MALDI-TOF-MS 2009.1.15 离子形成 离子源 离子检测器 数据分析 质量分析器 分离 检测 进样系统 样品导入 相对强度 % 质谱谱图 m/z 离子形成 离子源 质量分析器 分离器 EI CI（NCI/PCI） ESI/ APCI FAB FD FI MALDI Quadrupole Ion Trap Magnetic Field ICR TOF Tandem mass spectrometers (MS/MS): Triple Quadrupole (QqQ) Quadrupole/time-of-flight (QTOF and QSTAR) Tandem time-of-flight (TOF-TOF or TOF2) LTQ/Ion trap 质量分析器 串联分离器 AXIMA-Confidence （MALDI-TOF REFLECTRON） AXIMA-QIT (MALDI-IT-TOF) LCMS-IT-TOF (ESI-IT-TOF) AXIMA-Assurance （MALDI-TOF LNR） AXIMA-Performance (MALDI-TOF-TOF) AXIMA-QIT 的出色性能 TOFMS ◎ 高灵敏度 ◎ 高分辨 ◎ 高精确度 QIT ◎ 真正多极 MSn 分析 ◎ 提供更精确的分子结构信息. MALDI ◎ 更宽的样品适用范围 ◎ 更简便的样品处理过程 AXIMA-CFRplus (MALDI-TOF) 肽指纹图谱 AXIMA-TOF2(MALDI-TOF-TOF) 肽序列标签 + Laser Matrix(基质) + Analyte(分析物) Sample support + + + + 诺贝尔奖 － 田中耕一发现使用基质可分析生物大分子 - 蛋白质 基质的作用： 1. 把极性分子隔离开 2. 提供卷流，抛出样品分子 3. 提供反应离子 Sample Slide Laser (337nm) matrix sample Laser Analyte Sample Slide Matrix Sample Sample Slide m m C A Cation Anion m m m m m m m m m A C C m m m m m C+ C+ C+ e- A- m cation anion MALDI-TOFMS 工作原理 qV = 1/2(m1v12) = 1/2(m2v22) 若m1 m2, 则 v1 v2 t (m/z) 分辩率 ~ 400 飞行管 激光 样品靶 15-25 kV 检测器 无基质为 LD 不能分析大分子(碎裂) 常用基质 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic acid (Sinapinic acid, SA) 芥子酸 CH:CHCOOH OCH3 OH CH3O 2,5-Dihydroxybenzoic acid (Gentisic acid, DHB) 2,5-二羟基苯甲酸 OH HO COOH ?-Cyano-4-hydroxycinnamic acid (CHCA) 肉桂酸 CH:C(CN)COOH OH N H N Nor-harmane 2-咔啉 (通用性较好) 离子生成时 空间位置分散 (激光焦班 ~ 100-200 ?m) 时间分散 ( 激光脉冲宽度 3 ns ) 离子初始速度分散 ( 主要因素 ) MALDI-TOF 影响分辨率的因素 Shadowing Effects 影子效应 斜照影子长，位置分散大 垂直照射影子短 位置分散小 空间位置分散 MALDI-TOFMS 结构图 AXIMA-CFR plus SHIMADZU BIOTECH MCP 百页窗 SEM Detector +