中期因子在胃癌中的表达与细胞增殖的关系.pdfVIP

中期因子在 胃癌 中的表达与细胞增殖的关系米 徐莹莹 金 锋 王振宁 曲秀娟① 徐 玲① 曲晶磊① 摘要 目的 ：研究中期因子 (midkine，MK)在人 胃癌组织中的表达情况，探讨其与 胃癌细胞增殖的关系及分子机制。方法： 收集70例-临床 胃癌组织标本及其配对癌旁正常 胃黏膜组织标本，应用实时定量PCR技术检测中期 因子mRNA表达水平。构建 中期因子逆转录病毒载体，经DNA测序正确后，应用脂质体转染法将病毒载体转染GP293病毒包装细胞，48h后收集病毒上清。 分别用不同浓度的病毒上清感染人 胃癌SGC7901细胞，应用MTT法检测细胞增殖速率。应用免疫印迹技术检测中期因子影响 胃 癌细胞增殖的分子机制。结果：有65．7％(46／70)胃癌组织中中期因子表达量为癌旁jY_常胃黏膜组织2倍以上，而仅有 11．4％(8／ 70)癌旁正常胃黏膜组织中中期因子表达量为胃癌组织2倍以上，二者统计学有显著性差异(P0．05)。随着感染病毒浓度的增 加，中期因子蛋白表达水平逐渐增加 ，同时SGC7901细胞增殖速率逐渐加快。随着MK蛋白表达水平的增加，泛素连接酶CBL、 CBL—b蛋 白表达水平下降，磷酸化Akt蛋 白表达水平增加。结论 ：中期 因子在 胃癌组织中呈高表达；应用其逆转录病毒感染