胶团、反胶团萃取.ppt

（2）水相离子强度的影响 a：离子强度影响到反胶团内壁的静电屏蔽的程度，降低了蛋白质分子和反胶团内壁的静电作用力。 b：减小表面活性剂极性头之间的相互斥力，使反胶团变小。 这两方面的效应都会使蛋白质分子的溶解性下降，甚至使已溶解的蛋白质从反胶团中反萃取出来。 （3）助表面活性剂的影响 蛋白质的分子量往往很大，超过几万或几十万，使表面活性剂形成的反胶团的大小不足以包容大的蛋白质，而无法实现萃取，此时加入一些非离子表面活性剂，使它们插入反胶团结构中，就可以增大反胶团的尺寸，溶解相对分子质量较大的蛋白质。 （4）溶剂体系的影响 溶剂的性质，尤其是极性，对反胶团的形成和大小都有影响。 常用的溶剂有：烷烃类（正己烷、环己烷、正辛烷、异辛烷等）。 有时也使用助溶剂，如醇类。可以调节溶剂体系的极性，改变反胶团的大小，增加蛋白质的溶解度。 4、反胶团萃取相互作用 因分离中使用的表面活性剂种类不同，如阴离子型和阳离子型，其相互作用和分离原理也会不同。 以立体性、静电性、疏水性相互作用的分离特性归纳如下： 1）氨基酸分离特性 氨基酸分子量与反胶团相比太小，不存在反胶团-氨基酸分子间的立体性相互作用和分子间的大小识别。 但由于氨基酸因pH不同而发生正负电荷的变化和带有疏水性残基，所以，以静电和疏水性相互作用来定量评价氨基酸的萃取特性和效果。 如图，平均每单位正电荷量、每分子AOT，萃入的氨基酸分子数是一固定值，该值由氨基酸种类决定。 氨基酸残基的疏水性越大，该值越大。 2）酶、蛋白质萃取特性 酶、蛋白质等生物大分子的空间尺度与反胶团的大小相接近，故存在立体性相互作用。 各种相互作用都很重要，在大多数情况下，是它们之间的复合作用。 有些蛋白质的构象发生很小的变化时，就可能对这些相互作用的结果产生很大影响。 （1）静电性相互作用 ①小分子蛋白质（Mr20000） 当pH pI 时，蛋白质不能溶入胶团内，但在等电点附近，急速变为可溶。 当pH pI时，即在蛋白质带正电荷的pH范围内，它们几乎完全溶入胶团内 。 ②蛋白质分子量增大到一定程度，即使将pH向酸性一侧偏离pI，萃取率也会降低（即立体性相互作用效果增大）。 ③分子量更大的BSA，全pH范围内几乎都不能萃取（即静电相互作用效果无限小，可忽略不计）。 此时，AOT浓度如从通常条件（50~100mmol/L）增加到200~500mmol/L，逐渐变为可萃取。 ④降低pH，正电荷量增加，萃取率从某一pH开始，急速减小。 这是因为pH导致蛋白质变性造成的。蛋白质和微量的AOT在静电、疏水性等的相互作用下，在水相中形成了复合体而变性。 ⑤添加KCl等无机盐，因离子强度的增加和静电屏蔽的作用，而使静电性相互作用变弱，一般地，萃取率下降。 （2）立体性相互作用（空间位阻） 随蛋白质分子量的增大，蛋白质分子和胶团间的立体性相互作用增加，萃取率下降。 胶团萃取 胡姝姝 宋均凤 2016-11-28 目录 一、胶团与反胶团概述 二、反胶团的物理化学特性及制备 三、反胶团萃取机理 四、在分离工艺中的应用 一、胶团与反胶团概述 1、胶团的形成及特性 2、反胶团的形成及特性 3、表面活性剂 4、反胶团的分类  1、胶团的形成及特性 胶团或反胶团的形成均是表面活性剂分子自聚的结果，是热力学稳定体系。 将表面活性剂溶于水中，当其浓度超过临界胶团浓度（criticalmicelle concentration,CMC）时，表面活性剂就会在水溶液中聚集在一起形成聚集体，称为胶团（micelles）。 特性：水溶液中胶团的表面活性剂的极性基团向外与水相接触，而非极性基团在内，形成一个非极性的核心，此核心可以溶解非极性物质。 极性“头” 水 非极性的“核” 非极性“尾” 正胶团： 表面活性剂的极性头朝外，疏水的尾部朝内，中间形成非极性的“核” 2、反胶团的形成及特性 若有机溶剂中加入表面活性剂，当其浓度超过临界浓度时，就会在有机相中也形成聚集体，称为反胶团。在反胶团中，表面活性剂的非极性基团在外，与有机相接触，而极性基团则排列在内形成一个极性核。 特性：此极性核具有溶解极性物质的能力，极性核溶解水后，就形成“水池”。由于周围水层和极性基团的保护，保持了蛋白质的天然构型，不会造成失活。 极性“头” 有机溶剂 极性的“核” 非