仪器分析课件--紫外可见分光光度法.pptVIP

紫外－可见分光光度法 第一节 概述 分类：目视比色法 光电比色法 分光光度法 按所用的光的波谱区域不同又分为： 例题： 含铁量0.001%的试样，称 1g 试样，仅含0.01 mg Fe，用 1.6×10－3 mol·L－1 K2Cr2O7滴定，用去 V K2Cr2O7 ? 第二节 基本原理 1、光的基本特性 单色光和互补光 2、物质对光的选择性吸收－吸收曲线 吸收曲线的讨论： 物质吸收光谱产生的机理 物质吸收光谱产生的机理 3、吸收定律 3）偏离朗伯－比尔定律的原因 讨论： 1、显色剂用量 6、显色反应中干扰及消除 三元配合物较稳定，可提高分析测定的准确度与重现性 三元配合物比二元配合物灵敏度核对比度高 三元配合物选择性更高 改善显色条件…… 二、显色条件的选择 吸光度A 与显色剂用量CR的关系如图所示的几种情况。选择曲线平坦处。 M + R = MR 2、溶液酸度 选择曲线中吸光度较大，且恒定的平坦区所对应的pH范围。 3、显色温度 实验确定 4、显色时间 选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的时间。 5、溶剂 一般尽量采用水相测定 （1）干扰离子的影响 （2）干扰的消除方法 共存离子本身具有颜色 共存离子与显色剂或被测组分反应 共存离子与显色剂反应 控制溶液的酸度 加入掩蔽剂 改变干扰离子的价态 选择适当的入射光波长 选择合适的参比溶液 分离干扰离子 利用双波长、导数光谱法等新技术 三、测量条件的选择 1、入射光波长的选择 一般应该选择λmax为入射光波长。 如果 λmax 附近有干扰存在，选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长（曲线较平坦处） 选择参比溶液的原因 由于入射光的反射，以及溶剂、试剂等对光的吸收会造成透射光通量的减弱。为了使光通量的减弱仅与溶液中待测物质的浓度有关，需要选择合适的溶液作参比溶液。 2、参比溶液的选择 选择参比溶液的原则 尽可能全部抵消各种共存有色物质的干扰，使试液的吸光度真正反映待测物的浓度。 溶剂参比：仅有待测物质与显色剂的反应产物有吸收时。消除溶剂、吸收池等因素的影响。 试剂参比：显色剂或其他试剂在测定波长处有吸收时。消除试剂中的组分的影响。 试液参比：试样中其他试剂在测定波长处有吸收，显色剂在测定波长处无吸收时。用不加显色剂的“试液空白”作参比，消除有色离子的影响。 褪色参比：显色剂及样品基体有吸收，在显色剂中加入褪色剂，用褪色产物作参比溶液。 选择参比溶液的方法 3、吸光度测量范围的选择 某一给定的分光光度计透射比读数误差Δτ是一个常数，但同样透射比读数误差Δτ在不同透射比处所造成的浓度误差Δc/c是不同的。 微分整理后，可得： 令上式的导数为0，可求出τ＝0.368,A=0.434时， Δc/c最小。 在仪器透射比读数误差 ΔT＝±0.5%时： τ应在10％～70％之间。 A应在0.2～0.8之间。 四、定量方法 1、单组分样品的分析 工作曲线法 比较法 cx与cs浓度应接近，且都复合吸收定律。适于个别样品的测定。 2、多组分定量测定 吸收光谱曲线不重叠。 在各自最大吸收波长处分别测定。 吸收光谱曲线重叠 可以用x、y的标准溶液分别在λ1和λ2处测定吸光度后计算求得。 高含量组分的测定－示差法 紫外－分光光度法一般适用于含量10－2～10－6 mol?L－1 浓度范围的测定。高含量测定时误差大。 示差法：采用一个已知浓度成分与待测溶液相同，浓度稍低于待测溶液的溶液作参比溶液。适用于τ％10 的组分，误差可低至0.2%，准确度可与滴定法或重量法相媲美。 示差法标尺扩展原理 普通法：cs的 T＝10％，cx的 T＝5％ 示差法：cs做参比，调 T＝100％ 示差法：cx的 T＝50％，标尺扩展10倍。 双波长分光光度法 从光源发出的光经过两个单色器得到两束不同波长（λ1和λ2）的单色光，借助切光器使λ1和λ2交替通过同一吸收池，测定二波长下吸光度的差值ΔA，求得待测组分的含量。 常用等吸收法 适用于混合物和混浊试样的测定。由于采用了一个吸收池，消除了参比液和吸收池差异的影响，提高了方法的准确度。 因为 则 由于干扰组分a在λ1和λ2处其有等吸收，即： 所以 * * 1 概述 2 基本原理 3 紫外－可见分光光度计 4 可见分光光度法 5 目视比色法 6 紫外分光光度法 紫外－可见分光光度法（UV-Vis）是基于物质分子对200～780nm区域内光辐射的吸收而建立起来的分析方法。由于200～780nm光辐射的能量主要与物质中院子的价电子的能级相适应，可以导致这些电子的跃迁，所以又称电子光谱法。 紫外分光光度法（200～400nm）：电子跃迁光谱，可用于结构鉴定和定量分析。