N、 P、 K 速测.docxVIP

首都师范大学生命科学学院实验报告课程名称 植物生理实验 成绩姓名 班级 一班 学号 实验题目 植物的砂基培养实验（二） ——土壤和植物体中N、P、K主要养分的速测【实验目的】测定砂基培养实验(一)中各缺元素培养植株的N、P、K含量，进一步理解分析各元素在植物生理活动中的作用。【实验原理】1. 硝态N测定硝态N是硝酸的阴离子（NO3ˉ）,它是强氧化剂，所以鉴定Nˉ离子几乎都用氧化反应，用二苯胺（C6H5）2NH的方法，这个方法的原理是在NO3ˉ存在时二苯胺被硝酸氧化而显蓝色。其反应如下：〔O〕〔H〕N HN H ﹢H2O N ﹢H2O＝缩二苯胺氧化物（蓝色）2.有效P和无机P测定P与钼酸铵反应生成磷钼酸铵，然后以氯化亚锡作为还原剂时，使磷钼酸铵还原为“磷钼兰”（低价钼化合物混合物）溶液呈兰色。此法能测土壤有效P，过磷酸钙中有效P和植物体内的无机磷。 其反应如下：3.速效K的测定四苯硼钠〔NaB(C6H5)4〕与钾离子生成白色沉淀为四苯硼酸钾〔KB(C6H5)4〕。其反应如下：K+ + NaB(C6H5)4 →KB(C6H5)4↓+Na+ 白色沉淀【实验器材】1.材料：土壤和植物材料（缺乏不同营养元素的玉米苗或待测的其他植物苗）2.仪器和用具：小台秤、电炉、白瓷板、玻璃凹板、滴管、毛细玻璃管、指管、烧杯、剪刀、量筒、容量瓶3.试剂：1）0.5％HCl、 2）硝态N试剂、3）磷试剂I、 4）磷试剂II、 5）钾试剂、 6）标准溶液1、5、10、20、40ppm。【实验步骤及结果及结果分析】1. 植物组织浸提液制备：测定的植物组织（如叶鞘或叶片），剪成小块，称取1g，迅速的倒入已沸腾的蒸馏水（约10ml）烧杯中，用毛细玻璃棒经常搅动，小火煮十分钟，煮液倒入10ml容量瓶中，另加少量蒸馏水，继续小火煮植物材料5分钟，浸提液倒入上述容量瓶内，再以少量蒸馏水洗植物材料，使最后容量为10ml。植物组织在计算含量时要乘以10，因每克鲜组织稀释了10倍。（这里因为植物组织的水含量比较高，故将1克叶片当做1毫升组织）2. 硝态氮的测定在白磁板的凹内分别滴入1、5、10、20、40ppm的混合标准液1滴，然后将植物浸提液分别滴入其他凹内（反复3次），最后每个凹内各加5滴二苯胺硫酸溶液，用毛细玻璃棒搅匀，3~5分钟，观察标准液与待测液蓝色变化，待测液的蓝色近似于某标准液的蓝色，就是待测液的硝态N含量。如果待测液的颜色太深，则稀释一定的倍数再重复以上操作。以此方法，分别测定五种植物浸提液的氮含量，得到下表数据： 浸提液数据完全-N-P-K-Fe 测定含量40ppm1ppm10ppm30ppm15ppm稀释倍数2315待测液含量80ppm1ppm10ppm90ppm225ppm800ppm10ppm100ppm900ppm2250ppm 分析：相对于完全培养的植株，缺氮、缺磷、缺铁的植株的硝态氮的含量度表现出了明显的差异。高等植物的主要碳源是硝酸盐，如果吸收硝酸盐，必须经过代谢还原。因为在缺氮培养液中没有硝态氮，植株也只能通过根部吸收周围的硝态氮，所以其硝态氮含量极低；在氮的同化当中，要经过硝酸盐还原为亚硝酸盐的过程和亚硝酸盐还原成铵的过程；但植物吸收铵盐的氨后，需要进行氨的同化，这一过程需要ATP的参与，但是由于缺磷，导致这一步无法进行，不能合成相应的氨基酸。但是植株对于氨基酸的需求又促进了硝态氮的还原，所所以导致缺磷的植株的硝态氮的含量较低。缺铁的植株表现硝态氮的含量极高，这是因为硝酸盐在还原代谢过程中需要光合作用供给电子，故在缺铁的情况下，叶绿素含量低，导致硝态氮的还原不能正常进行，硝态氮含量极高。3. 有效P和无机P测定在白磁板的凹内，分别滴入1、5、10、20、40ppm混合标准液和待测液各5滴，然后加入钼酸铵硫酸溶液1滴，用毛细玻璃棒匀后，加入氯化亚锡甘油溶液1滴，搅匀，比较标准液和待测液的蓝色，求出待测液的有效磷的含量（ppm），蓝色愈深，有效磷含量愈高。得到如下数据：完全-N-P-K-Fe测定含量20ppm20ppm1ppm35ppm25ppm稀释倍数待测液含量20ppm20ppm1ppm35ppm25ppm植株含量200ppm200ppm10ppm350ppm250ppm分析：从表中数据可以看出，相对于完全培养的植株，缺磷的植株的有效磷含量极低，很明显，植株本身不能合成有效磷，在培养液中缺磷的情况下，植株也缺磷。4. 速效K的测定在透明凹玻璃（下面垫有黑纸）的凹内，分别滴入1、5、10、20、40ppm混合标准液和待测液1滴，然后加四苯硼钠溶液1滴，十分钟后在阳光下比较标准液与待测液的白色混浊，找出相应的钾含量（其中K各乘以5ppm）。完全-N-P-K-Fe测定含量404040340稀释倍数344待测液含量120160403160植