胃癌Her2的检测.pptVIP

胃癌HER2的标准化检测 周晓军 南京军区南京总医院 胃癌组织学类型(WHO2000)： 1．管状腺癌（adenocarcinoma）最多见。分高、中、低分化，此型癌多为高分化，恶性度较低，转移较晚。 2．乳头状腺癌（ papillary form）：腺腔内 出现许多乳头。 3．印戒细胞癌（signet-ring cell）：癌细胞胞浆内出现大量偏酸性粘液，常将胞核挤压于癌细胞浆之一侧，形似戒指，故称之为印戒细胞癌。 4……. Lauren分型(1965): 根据胃癌细胞形态和胃癌组织中粘液性质将胃癌分为肠型和弥漫型两大类。 肠型胃癌中唾液酸粘液及硫酸粘液多见，发生于肠化生上皮；肠型胃癌多见于老年患者，恶性度较低，分化程度差别大，与肿瘤大小反比，组织学上多为乳头状腺癌或腺管状腺癌。 弥漫型胃癌中中性粘液多见。弥漫型胃癌多见于青年人，恶性度较高，肉眼类型多为皮革胃，组织学上多为粘液细胞癌（印戒细胞癌）及未分化癌。 Ming（1977）：膨胀型 VS 浸润型 胃癌HER2检测 比值 2.2 提示Her-2无扩增 比值 2.2提示Her-2有扩增 比值介于1.8～2.2临界值 Aneusomy, Not amplified Fig. 1 HER-2 protein expression evaluated by immunohistochemistry (A-C) (original magnification 200) and HER-2 gene amplification assessed by FISH (D-F) (original magnification 1000) in gastric carcinoma tissue. A and D, 3+ by immunohistochemical staining with HER-2 amplification. B and E, 2+ by immunohistochemical staining with HER-2 amplification. C and F, 1+ by immunohistochemicalstaining with HER-2 amplification. 胃癌HER2检测的流程 多处活检的必要性 胃癌HER2检测的特性 胃癌HER2检测的特性 明视野技术有利于发现HER2阳性肿瘤区域 相比乳腺癌，着色异质性在胃癌和胃食管结合部癌更常见1 胃癌中， 5–30%病例会出现肿瘤异质性1-3 胃癌HER2检测的特性 胃癌HER2检测的评分标准 完全、基侧膜或侧膜染色反应 HER2阳性胃癌和胃食管结合部癌可能表现为基侧膜、侧膜或完全膜染 底侧膜、侧膜染色的发生通常与低分化胃腺癌细胞结构有关 IHC染色强度对应的放大倍率 为了分辨明显的细胞间（完全、底侧膜或侧膜）的膜染色，所需的显微镜放大倍率（~ 工作距离） 放大倍率和HER2评分 IHC: 样本排除标准 IHC: 评分标准 胃癌HER2检测的特性 可接受赫赛汀胃癌治疗的欧盟标准 成功的HER2检测需要多学科合作 Denature target DNAand hybridise probe Primary antibody binds to the probe Secondary antibody (with unactivatedvisualisation agent)binds to primary antibody 色素原位杂交法原理chromogenic in situ hybridization (CISH) CISH：无HER2基因扩增 CISH： HER2基因低扩增 CISH： HER2基因高拷贝扩增  IHC检测: 抗原修复 有 / 无 组织固定 方法 抗体选择 评分标准 变异性 IHC vs FISH C-erbB2 score Gene amplification by FISH 0 4% 1 7% 2 10-35% 3 90% 胃癌HER2检测 胃癌HER2检测 HER2检测流程 组织采集 组织形态 检测耗时 评分标准 足够数量的有代表性的活检标本（推荐6–8个） 有代表性的手术标本 Image courtesy of Prof. G Viale HER2检测流程 组织采集 检测耗时 评分标准 足够数量的有代表性的活检标本（推荐6–8个） 有代表性的手术标本 肿瘤异质性高(HER2-阳性位点范围小) FISH检测应筛查整个切片 组织形态 HER2检测流程 和乳腺癌相似 首先采用免疫组化法（IHC） 检测 HER2-阳性: IHC 3+ 或 IHC 2+/FISH+ 明视野方法优先 足够数量的有代表性的活检标本（推荐