蒜素提取与抑菌试验.docVIP

大蒜素提取与抑菌试验方案 一、大蒜素提取 1 材料与方法 1.1材料 1.1.1菌种。金黄色葡萄球菌( Staphylococcus aureus) 1． 1． 2 培养基。 MH 肉汤培养基（购自上海顺勃生物工程技术有限公司） 营养肉汤培养基: 牛肉膏 3 g，蛋白胨 5 g，蒸馏水1 L; 牛肉膏蛋白胨培养基: 牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，氯化钠5 g，蒸馏水 1 L。 1． 1． 3 试剂。 磷酸氢二钠，磷酸二氢钠。 1． 2 方法 1.2.1 大蒜溶液与大蒜素的测定 取蒜叶称 10g，加 10 ml 磷酸盐缓冲液( pH 7.8) ，后3 500 r/min 离心 10 min，取上层清液真空抽滤 2 次，收集滤液，过 滤 法 灭 菌，备 用。用 定 硫 法 测 定大 蒜 素含量。 （1）大蒜素提取方案一——————定硫法 1 实验部分 1、1 测定原理 大蒜中蒜氨酸的亚砜基()SO+))和大蒜素的硫代亚砜基()SO+)S)被浓硝酸氧化成硫酸离子, 与氯化钡反应形成硫酸钡沉淀,根据硫酸钡的重量换算出大蒜素的含量。 1、2 试剂 硝酸(GR),10%氢氧化钠(AR),氯化钠(AR),甲基橙(AR)、硝酸银溶液15%氯化钡液, 1、3 测定方法 将蒜叶,准确称取5 g(精确至0.0001 g), 加浓硝酸3 ml~4 m