HPV分子诊断的实验室质控09.ppt

HPV持续感染的危险性评定（2） 持续感染情况（相隔2年） 致非典型鳞状上皮细胞的危险系数 致宫颈低度病变的危险系数 致宫颈高度病变的危险系数 连续两次检测都为阴性 1.0 1.0 1.0 第一次第二次都为阳性，但感染亚型不同 16.8 73.2 192.7 第一次第二次都为阳性，感染亚型至少有一种是相同的 没有病例 117.9 813.0 Susanne K Kjaer,et al. Type specific persistence of high risk human papillomavirus (HPV) as indicator of high grade cervical squamous intraepithelial lesions in young women:population based prospective follow up study. BMJ VOLUME 325 14 SEPTEMBER 2002 我们不能保证女性不感染HPV 但我们能保证女性不患子宫颈癌 谢谢！ * * 原理：是应用微板的化学发光信号放大核酸杂交实验。样本中的靶DNA与全长的HPV RNA探针杂交。产生的杂交体被微板孔表面包被的抗-RNA：DNA抗体捕获。之后，再与碱性磷酸酶交联反应，并检测化学发光底物。每个抗体分子可以交联多个碱性磷酸酶分子，最终导致信号的放大。由于碱性磷酸酶裂解底物，施放的光可以被照度计以RLU为单位测量。发出的光密度表面靶DNA的存在与否。RLU大于或者等于CUTOFF值表明样本中存在高危型DNA序列，反之则没有。 原理：是应用微板的化学发光信号放大核酸杂交实验。样本中的靶DNA与全长的HPV RNA探针杂交。产生的杂交体被微板孔表面包被的抗-RNA：DNA抗体捕获。之后，再与碱性磷酸酶交联反应，并检测化学发光底物。每个抗体分子可以交联多个碱性磷酸酶分子，最终导致信号的放大。由于碱性磷酸酶裂解底物，施放的光可以被照度计以RLU为单位测量。发出的光密度表面靶DNA的存在与否。RLU大于或者等于CUTOFF值表明样本中存在高危型DNA序列，反之则没有。 标本采集的质量控制 H1N1更新信息 －Jun 11th， 2009 标本采集的质控 尼龙植绒拭子 传统的人造纤维拭子 利用静电效应 吹塑植绒 优异的标本采集和释放能力 Swab A = 植绒拭子 Swab B = 棉拭子 Almost 100% of the sample collected is available for the test !!! CONCLUSIONS …… 尼龙植绒拭子比传统的人造纤维拭子通过获得更多的DNA拷贝数，提供了更高的敏感率。 √ SAMPLING OF HUMAN PAPILOMA VIRUSES AND CHLAMYDIA TRACHOMATIS: NOVEL FLOCKED SWABS INCREASE DETECTION RATES SIGNIFICANTLY. 人乳头瘤病毒（HPV）和沙眼衣原体（CT）的取样： 尼龙植绒拭子明显增加侦测阳性率 RESULTS Flocked Swabs Rayon Swabs RESULTS Flocked Swabs Rayon Swabs RESULTS Rayon Swabs Flocked Swabs RESULTS 494 个无症状患者用两种拭子分别测试了沙眼衣原体（CT）和人乳头瘤病毒（HPV）。 ? 尼龙植绒拭子从阴道标本中检测到68例HPV阳性，人造纤维拭子只检测到38例阳性，漏检30例。 ?对沙眼衣原体，尼龙植绒拭子从阴道标本中检测到13例阳性，人造纤维拭子只检测到9例阳性，漏检4例. ?所有被人造纤维拭子采样得到的阳性结果，在尼龙植绒拭子中同样为阳性。 ?在119对阴道/宫颈标本中，尼龙植绒拭子从阴道标本中检测到20（14）例HPV阳性和6 (4)例沙眼衣原体阳性，从宫颈标本中检测到10 (6) 例HPV阳性和6 (4)例沙眼衣原体阳性；从阴道标本中检测到20（14）例HPV阳性，从宫颈标本中检测到5 (3)例HPV阳性 ?尼龙植绒拭子从阴道拭子中检测HPV阳性率为14.1%，平均141 RLU/CO ；人造纤维拭子从阴道拭子中检测HPV阳性率为7. 9% ，平均70 RLU/CO . ?尼龙植绒拭子从阴道拭子中检测沙眼衣原体阳性率为2.7% ，平均51’869 DNA-Copies/ml ；人造纤维拭子从阴道拭子中检测沙眼衣原体阳性率为1.9% ，平均9178 DNA-Copies/ml。 ?与传统的人造纤维拭子相比，用尼龙植绒拭子采样可将从阴道拭子中获得的HPV阳