在发酵过程中.PPT

2.多罐染菌 系统问题，如空气过滤系统有问题。 染菌情况分析 3.前期染菌 种子带菌、培养基灭菌不彻底。 4.中后期染菌 补料的料液灭菌不彻底或补料管道、阀门渗漏，一般不会是种子问题。 1.防止种子带菌 染菌情况分析 制备种子时对沙土管及摇瓶严格加以控制 沙土制备时要多次间歇灭菌 注意接种时的无菌操作 子瓶、母瓶的移种和培养。 无菌室和摇床间都要保持清洁 无菌室内要供给恒温恒湿的无菌空气 还要装紫外灯用以灭菌，或用化学药品灭菌。 2.防止设备渗漏 染菌情况分析 渗漏原因 化学腐蚀、电化学腐蚀，物料与设备摩擦造成机械磨损 以及加工制作不良等。 试漏方法 水压试漏法。 即被测设备的出口处装上压力表，将水压入设备，待设备中压力上升到要求压力，关闭进出水，看压力有否下降。压力下降则有渗漏。 试漏方法 集气桶来试漏 3.防止培养基灭菌不彻底 染菌情况分析 灭菌方法 高压蒸汽灭菌 分批灭菌：121℃，30min 连续灭菌：罐温125~130℃，30~45min 连续灭菌设备流程 批式灭菌设备 连 消 塔 空气过滤除菌设备流程 空压机 储罐 二级冷却 加热器 空气过滤 粗过滤 发酵染菌后的措施 灭菌方法：通入蒸汽灭菌；加入过氧乙酸等化学灭菌剂搅拌30min 罐也要彻底清洗，进行空罐消毒，才可进罐。 空气用甲醛熏蒸。特别，若染噬菌体，空气必须用甲醛蒸汽消毒。 染菌后的培养基必须灭菌后才可放下水道 凡染菌的罐要找染菌的原因 染菌厉害时，车间环境要用石灰消毒 第五章 发酵过程的工艺控制 第五节 溶氧对发酵的影响及其控制 第六节 补料对发酵的影响及其控制 第七节 发酵终点的判断 发酵过程中溶氧变化 菌体生长，溶氧出现低峰； 溶氧水平相对较稳，会受补料、消沫油的影响； 菌体衰老，溶氧逐步上升。 发酵前期 产物合成期 发酵后期 溶氧变化的原因 污染好气性杂菌 菌体代谢异常 设备发生故障或工艺控制发生变化 溶氧下降的原因 溶氧升高的原因 污染烈性噬菌体 产生菌尚未裂解，呼吸就受到抑制→溶氧明显上升。 菌体破裂会完全失去呼吸能力→ 溶氧直线上升。 溶氧的控制措施 控制菌浓在比临界菌体浓度高一点的水平，达到最适浓度，从而控制需氧。 控制需氧量 提高供氧量 提高氧传递的推动力和液相体积氧传递系数KLa。 可通过控制基质浓度 控制菌浓 受温度、罐压、发酵液的性质的影响（难改变） 提高搅拌转速、增大通气流速、降低粘度等。 补料对发酵的影响 可以控制抑制性底物的浓度 可以解除或减弱分解产物阻遏 可以使发酵过程最佳化 补料的控制 反馈控制 无反馈控制 发酵终点的判断 生产能力是指单位时间内单位罐体积所积累的产物量，其单位是g/L?h。 发酵终点 发酵末期，菌体的分泌能力都要下降，使产物的生产能力下降或停止。 发酵末期有些产生菌还会发生自溶。 确定合适的微生物发酵终点，对提高产物的生产能力和经济效益是很重要的。 发酵终点的判断 最适发酵时间：以能最大限度地降低成本和最大限度地 取得最大 生产能力的发酵时间。 发酵终点的判断 发酵时间长短对后步提取工艺和产品质量有很大的影响 染菌、异常代谢时，需要适当处理。 发酵终点的判断 合理的发酵终点即放罐时间由实验来确定。 发酵终点的确定 采用生产力高而成本又低的发酵时间作为放罐时间。 综合考虑一些参数。 食 品 发 酵 工 程 概 论 主讲教师：郑艳 第五章 发酵过程的工艺控制 第一节 pH对发酵影响及其控制 第二节 温度对发酵的影响及其控制 第三节 泡沫对发酵的影响及其控制 第四节 染菌对发酵的影响及其控制 发酵过程中pH波动的原因 基质的代谢 糖代谢 氮代谢 生理酸碱物质 产物的形成 有机酸 生物碱 抗生素等 菌体的自溶 pH 7.0 t 不调pH 调pH 效价 pH 例 pH波动对克林霉素发酵的影响 例：培养基初始pH值对漆酶分泌的影响 pH在4~7范围内产酶最高 pH 酶活力 pH 酶活力 1 13.1 7 119.5 2 54.8 8 94.5 3 92.3 9 89.4 4 106.3 10 67.1 5 122.2 11 28.3 6 131.6 12 10.6 pH波动对发酵的影响 影响酶蛋白的活性 影响微生物细胞膜带电情况 影响营养物质和某些中间代谢物的解离 影响代谢反应的方向 pH在微生物培养的不同阶段有不同的影响 青霉素：菌体生长最适pH3.5~6.0,产物合成最适pH7.2~7.4 四环素：菌体生长最适pH6.0~6.8，产物合成最适pH5.8~6.0 生长 合成 X pH 四环素 pH对菌体生长影响比产物合成影响小 pH 的控制 调节好基础料的pH 发酵菌种生长最适的pH 培养基灭菌后pH会有所降低 基础料中加入维持