生姜中涕灭威及其代谢产物的HPLC快速检测法.pdfVIP

生姜中涕灭威及其代谢产物的 HPLC 快速检测法 *1 2 1 蔡金娟 ，徐光乐 ,南芳 （1.潍坊汇海农产品检测有限公司， 潍坊 261031，2.潍坊市寒亭区农业局， 潍坊 261031） 摘要：建立了涕灭威、涕灭威亚砜和涕灭威砜在生姜中残留量的高效液相色谱快速检 测方法。样品用乙腈提取，加入 PSA 粉去除脂类物质，加入 C18 粉去除色素和维生素。采 用甲醇、水和乙腈进行梯度洗脱。结果表明：该方法在在 0.05～5.0mg/L 范围内，涕灭威、 涕灭威亚砜和涕灭威砜峰面积与其浓度呈现良好的线性关系;在 0.01,0.025 和 0.050mg/kg3 个添加水平下,3 种农药回收率为 78.33～101.33%,相对标准偏差为 4.08～ 11.46%.该方法灵敏度高,涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜的最低检出限分别为 0.005、0.01 和 0.01 mg/kg。 关键词：涕灭威；涕灭威亚砜；涕灭威砜；生姜；高效液相色谱；残留 涕灭威是近年来使用较多的一种氨基甲酸酯类农药，主要用于生姜种植过程中螨虫、 线虫的防治。纯品为白色结晶，略带硫磺气味，高毒。该药在植物体内先被氧化成涕灭威 亚砜，而后被氧化成涕灭威砜，进而水解为无毒物质[1]。涕灭威亚砜和涕灭威砜具有很高 的毒性。日本肯定列表对两者在生姜中的限定值均为 0.01mg/kg。从 1977 年 Moye 等第一 次采用 HPLC柱后衍生测定氨基甲酸酯类农药以来，这种检测方法的使用越来越普遍[2]。目 前，关于生姜中涕灭威及其代谢产物的残留分析方法国内尚未见公开报道。本文采用高效 液相色谱法，研究建立了生姜中涕灭威及其代谢产物残留检测方法。该方法用乙腈进行提 取，加入 C18 粉和 PSA 粉去除生姜中的干扰物质。方法简便、快捷。对于掌握涕灭威及其 代谢产物在生姜中的残留状况，具有一定的指导意义。 1.实验部分 1.1 仪器和试剂 SHIMADZU LC-20A 高效液相色谱仪（配有荧光检测器和柱后衍生系统）；IKA-T25 高速 匀浆机；METTLER TOLEDO PL203 电子天平；EYELA(日本)半自动旋转蒸发仪；EYELA(日本) 振荡器；高速离心机（上海安亭）；超纯水器（密理博）。 乙腈（色谱纯，TEDIA）;甲醇（色谱纯，TEDIA）；C18粉（SUPELCO）;PSA 粉（SUPELCO）； NaCL（优级纯）；无水硫酸钠（优级纯）；NaOH（优级纯）；四硼酸钠（基准物质）；邻苯二 甲醛（OPA）；涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜标准品（农业部环境保护科研监测所监制）。 1.2 衍生试剂的配置 1.2.1 称取 1gNaOH,加入 500ml 超纯水定容，过 0.2um 膜待用。 1.2.2 称取 0.015g 邻苯二甲醛，加入 50ml 甲醇使其完全溶解后，加入 0.18gNaOH 和 3.34g 硼酸，用 500ml 超纯水定容后，过 0.2um 膜，加入 50ulβ－巯基丙 1.3 色谱条件 色谱柱:FC-ODS 柱 （4.6mm×75mm）；流动相:甲醇、水和乙腈，采用梯度洗脱 （见表 1） ； 流速：0.5ml/min；柱温箱温度：50℃；荧光检测器：激发波长 （340nm），发射波长 （445nm）； 柱后衍生系统流速：0.5ml/min；进样量：2ul。 2 1.4 样品前处理 1.4.1 样品的提取 准确称取生姜样品 20.00g，置于 80ml 离心管中，加入 40ml 乙腈，匀浆 1分钟后，加 入 5gNaCL，再次匀浆 1分钟，离心 5 分钟后吸取上清液 10ml，40℃低温旋蒸近干，残留用 4ml 乙腈溶解待用。 1.4.2 样品的净化 5ml 离心管中依次加入 150mgC18 粉，150mgPSA 粉和200mg 无水硫酸钠。将 1.4.1 所得 溶液转移到上述离心管中，漩涡振荡 2 分钟后离心。吸取上清液 2ml于 250ml 鸡心瓶中， 40℃旋蒸近干，氮气吹干后，用乙腈定容至 2ml，过 0.45um膜上机待测。 2.结果与讨论 2.1 方法的线性关系及检出限 配置涕灭威、涕