广东省天河区重点高中2018高考生物一轮复习专项检测试题38201712090254.docVIP

广东省天河区重点高中2018高考生物一轮复习专项检测试题38 1.下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答： （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。 （2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号）。 A.启动子 B. tetR C.复制原点 D. ampR （3）过程①可采用的操作方法是 （填字母代号）。 A.农杆菌转化法 B. 大肠杆菌转化法 C.显微注射法 D. 细胞融合 （4）过程②可采用的生物技术是 。 （5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。 （6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术。 A.核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C.抗原—抗体杂交 D. PCR 【答案】Ⅰ. （1） （2） （3） （4） （5） （6） 【解析】（1）图中①所指的是 技术。 （2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。 （3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。 （4）检测rhEPO的体外活性需要抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。 （ ） 【答案】（10分） （1）（2）（3）（4）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是用限制性核酸内切酶切割烟草叶病毒的核酸 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 将重组DNA分子导入原生质体 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞【解析】 4.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，l、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： （1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。 （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 （7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 （4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 （5）DNA连接 （6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞 （7）蔗糖为唯一含碳营养物质 【解析】本题考查基因工程的限制性内切酶的作用特点 （ ） （1）质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。从 图1可以看出，质粒上只含有一个SmaⅠ的切点，因此被改酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每 条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团。 （2）由题目可知，SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以 形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多，热稳定性就越高 （3）质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图2可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaⅠ酶切位 点，都可以被SmaⅠ破坏，故不能使用该酶剪切含有目的基因的DNA （4）只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因 自身连接物，而利用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ（6）质粒上的抗性基因为标记基因，用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞。 （7）将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能