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色谱定量分析结果数据处理 相关系数——用来表示线性关系的好坏程度 相关系数越接近1，说明线性关系越好 色谱定量分析绘制标准工作曲线时需要计算相关系数，只有当相关系数大于某个限定值，才能说明配出的回归直线是有意义的。绘制标准工作曲线时一般选取3-6个不同浓度的标准样品，相关系数起码应在0.95以上。如达不到要求，可能存在以下原因：1、所选浓度范围使检测器的响应值超出了该检测器响应值的线性范围；2、实验数据的精密度太差，过于分散。无论何种原因，都应重新绘制标准工作曲线 。 色谱定量分析结果数据处理 注意的问题1、绘制标准工作曲线时，不同浓度的标准样品的数量一般不少于3个，多数取4-6个;2、标准样品的浓度间隔一般是等间隔，或两头稍密，中间宽些；3、待测组分浓度最好在标准工作曲线的中部，标准工作曲线一般不能外推；4、在扣除各种空白干扰后，一般可将原点视为标准工作曲线应通过的一点，即a值尽可能小。 谢谢大家！ * 色谱定量方法 马育松 河北检验检疫局检验检疫技术中心 内容 定量分析基础 定量方法 影响定量分析结果准确性的因素 色谱定量分析结果数据处理 定量分析基础 定量分析定义 定量分析就是要确定样品中某一组分的准确含量。 色谱定量分析是一种相对定量方法，是根据检测器的响应值与被测组分的量，在某些条件限定下成正比的关系来进行定量分析的。 色谱定量分析的基本公式 Wi（ci）=fiAi（hi） Wi——组分的质量； ci——组分的浓度； fi——组分的校正因子； Ai——组分的峰面积； hi——组分的峰高。 想得到可靠的定量分析结果，需要准确测定fi、Ai或hi 峰面积和峰高 峰面积——色谱峰与峰底（或基线）所围成的面积； 峰高——色谱峰峰尖至峰底（或基线）的距离； 峰底——从峰的起点与峰的终点之间的一条连接直线； 基线——在正常操作条件下，仅有流动相通过检测器时所产生的响应信号曲线； 一个完全分离的峰，峰底和基线是重合的。 峰面积和峰高的测定 使用积分仪和色谱工作站测量峰面积和峰高仪器根据设定的积分参数（半峰宽、斜率、最小峰面积或峰高等）和基线的设定来计算每个色谱峰的峰面积和峰高 使用记录仪记录色谱峰需要手工测量的方法计算色谱峰的峰面积和峰高 定量校正因子的测定 绝对校正因子前述公式中，fi为i组分的校正因子，其物理意义是单位峰面积（峰高）所代表的i组分的量，是一个与i组分的物理化学性质和检测器性质有关的常数；对同一个检测器，等量的不同物质其响应值是不同的，但对于同一种物质其响应值只与该物质的量（或浓度）有关。 绝对校正因子 计算公式 fi=mi(ci)/Ai(hi) mi(ci)——i组分的质量（浓度）； Ai(hi)——i组分的峰面积（峰高）。 由上式计算出的校正因子称为绝对校正因子，它只适用于这一个检测器。 相对校正因子 相对校正因子(f)是某物质(i)与基准物质(s)的绝对校正因子之比。 计算公式 f=fi/fs= mi(ci) × As(hs) /[ms(cs) × Ai(hi)] 常用的基准物质对不同检测器是不同的热导检测器——苯氢火焰离子化检测器——正庚烷 定量方法 色谱中常用的定量方法归一化法标准曲线法内标法标准加入法 按测量参数分为峰面积法和峰高法 峰面积法和峰高法的选择 如何选用主要决定于在检测器的线性范围内，峰高和峰面积测量的准确性和重复性。 在分离度较好，色谱峰形较好，峰面积可以准确测量时，特别是气相程序升温和液相梯度洗脱时，适宜用峰面积法定量；反之，如分离不好、峰形不佳时，用峰高法定量较好。 保留时间短峰形较尖的色谱峰，峰高法比峰面积法更准确；保留时间长峰形较宽的色谱峰，峰面积法比峰高法更准确。 归一化法 定义——把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法。 当样品中的所有组分均能流出色谱柱，并在检测器上都能产生信号的样品，可用归一化法定量。 计算公式 归一化法 优点简便、准确，特别是进样量不容易准确控制时，进样量的变化对定量结果的影响很小。其它操作条件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。 缺点校正因子的测定较为麻烦 主要用于GC的定量测定。 标准曲线法 也称为外标法，是色谱定量分析中比较常用的方法。 具体做法：1、配制不同浓度的标准系列，在规定的色谱条件下进样，测量色谱峰的峰面积或峰高，用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准工作曲线；2、在与绘制标准工作曲线完全相同的色谱条件下进行样品的测定，测量色谱峰的峰面积或峰高，然后根据峰面积或峰高在工作曲线上查出样品组分的浓度；3、根据样品处理条件，计算原样品中组分的含量。 标准曲线法 单点校正法——当待测组分含量变化不大，且已知这一组分的大概含量时，也可不必绘制标准工作曲