水稻淀粉分支酶基因(RBE4)作为转基因水稻基体标准物质的内标准基因的研究.pdfVIP

一 篙÷蕊嚣? Online 壤羲熊鞲撩磙擘懿 system：http：／／www．jabiotech．org ：Ⅻ赢…．。。。 农业生物技术学报 —●睡日 of Journal Biotechnology Agricultural 翻霹圈，目 1)：1234～1243 2012，20(1 !竖墨 1．002 j誉蔗i=_：：==一一 DOI：10．3969／j．issn．1674—7968．2012．1 研究论文 Article 基因的研究 余笑波1崔海峰1俞晓平1隋志伟2李亮2王晶2叶子弘1+ 1巾国计量学院，杭州I310018；2中国计量科学研究院，北京100013 +通讯作者，zhye@cjlu．edu．cn 摘要 reference 内标准基[因(endogenousgene)是指具有物种专一性、不显示等位基因变化、拷贝数恒定 的保守DNA序列，对基因定量分析时具有重要意义。本研究选取了5个水稻内标准基因：根部表达的水 稻基因(rice root—specific，GOS9)、磷脂酶D基因(phospholipase starch phosphatesynthase，sin)、水稻淀粉分支酶基因(ricebranching (ubiquitin sativaL．)克螟稻2号和 已知浓度的标准曲线来定值，可以避免标准样品的标准曲线和样品目的基因的扩增曲线在扩增效率上的 不一致等因素所带来的误差，定值结果更加准确、可靠，采用数字PCR分析外源基因拷贝数与内标准基 克螟稻2号的最小检出5E(LOD)分别为5～11copies／¨L和3-12 11～22和12～24 果为转基因作物标准物质研制和定量检测的内标准基因选取提供一定的参考。 关键词转基因水稻，内标准基因，定量检测，基体标准物质 StudiesonRiceStarch BranchingEnzyme(RBE4)as ReferenceMaterialof Rice ReferenceGenefortheMatrix Transgenic sativa (OryzaL．) YUXiao-B01CUI YU SUIZhi—Wei2LI WANGYE Hai-Fen91Xiao—Pin91 Lianga Jingr2 Zi-Hon91+ 1 ofLife NationalInstitute 100013，China College Sciences，ChinaJiliangUniversity，Hangzhou310018，China；2 ofMetrology，Beijing +Correspondingauthor，zhye@cjlu．