五味子甲素对小鼠的急性毒性实验.docVIP

精品论文 参考文献 五味子甲素对小鼠的急性毒性实验 刘艳 （辽宁省大连市第五人民医院药剂科 116021） 【摘要】 目的 观察五味子甲素对小鼠的急性毒性作用。方法　采用灌胃方法，一次性给药后连续观察7-14天，检测药物对小鼠的急性毒性反应。结果　未测得小鼠灌胃给予五味子甲素的半数致死量，灌胃给药小鼠的最大给药量为8000mg/kg。结论　五味子甲素口服给药较为安全，没有明显的急性毒性反应。 【关键词】 五味子甲素 急性毒性实验 最大给药量 五味子为五味子科植物五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. 的干燥成熟果实，主产于东北各地，称为北五味子；或为华中五味子S. Sphenanchera Rehd. et Wils (习称南五味子)的成熟果实。《神农本草经》已有记录，其性温，味酸、甘，归肺、心、肾经，可益气滋肾、生津敛汗、涩精止泻，宁心安神[1]。 五味子的主要化学成分为木脂素类???其中五味子甲素(去氧五味子素、五味子素A，deoxyschisandrin)为其主要活性成分之一。对五味子及其成分的现代药理研究多集中在生药、提取物上，而对单一有效成分的研究有其是五味子甲素的研究较少。为评价其安全性，为后续的药理研究提供实验依据，本实验通过对小鼠灌胃给药，观察五味子甲素的急性毒性，实验结果报告如下。 1 材料 1.1 动物 昆明种小鼠90只，体重18-22g，雌雄各半,由大连医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(辽)2008-0002。 1.2 试剂 五味子甲素由中科院大连化学物理研究所1806课题组提供，实验时用含0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)的生理盐水配制成所需药物浓度。 2 方法 2.1 灌胃给药途径半数致死量(Median lethal dose, LD50)的测定[2] 为测定LD50，先做预实验，找出0%(Dn)和100%(Dm)，估计致死剂量。配制系列浓度药液，取小鼠20只，分层随机分为4组，每组5只，分别灌胃给予4000、2000、1000、500mg/kg的五味子甲素，以0.2ml/10g的给药量灌胃给药，连续观察7天，记录动物死亡情况。 2.2 最大给药量(Maximum administration dosage)实验[3] 如不能测出五味子甲素的LD50，则需进行最大给药量法急性毒性实验即最大给药量实验。由于能够保证小鼠经12号小鼠灌胃器完成灌胃操作的五味子甲素的最大浓度为20%，小鼠灌胃可承受的最大体积为0.4ml/10g体重，以此条件(即8000mg/kg)一次性灌胃给予五味子甲素，给药后常规饲养；同时设置空白组，一次性灌胃等体积0.5%CMC-Na的生理盐水溶液，均连续观察14d。 根据预实验结果，取40只小鼠分层随机分给药组及对照组，每组20只，雌雄各半。灌胃前禁食不禁水12h，各组小鼠分布按剂量一次性给药。给药后常规饲养，观察14天。第14天断颈处死小鼠，观察各内脏器官的变化。 2.3 观察指标 2.3.1 一般观察 小鼠给药当天，尤其是给药后4h内严密观察。然后每天上、下午各1次，连续观察14d，包括动物精神状态，饮食、行为、分泌物、排泄物等，并记录中毒死亡时间，中毒反应起始时间，持续时间，恢复期是否可逆。 2.3.2 体质量 分别在给药前1天、给药后第1天、给药第7天，给药第14天记录体质量。 2.3.3 剖检 在观察期(14d)结束后进行大体解剖，观察心、肝、脾等主要脏器。 3 结果 3.1 灌胃给药LD50测定结果 一次性灌胃五味子甲素后，500-4000mg/kg各剂量组小鼠均未有死亡，因此在该条件下，无法测定出LD50。 3.2 最大给药量测定结果 按8000mg/kg剂量一次给予小鼠后，小鼠未死亡，因此其最大给药量确定为8000mg/kg。 3.3 观察项目结果 灌胃后第1天，小鼠精神萎靡，活动减少，食欲下降。自第2天开始恢复，进食量增加，呼吸正常，没有出现喘息、急促等异常。自发活动正常，翻正反射正常，无抽搐，无惊厥现象发生。分泌物、排泄物正常，无腹泻，体重正常增长。观察期结束后，对小鼠进行大体解剖，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等各主要脏器，未发现有出血、水肿、充血等异常情况。见表1。 表1 五味子甲素最大给药量实验小鼠反应情况