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纽荷尔脐橙的组织培养初报 潘佑找沈文光 (长江大学园艺园林学院434025) 摘要 以成年纽荷尔脐橙不同枝梢的茎段为外植体，取4—5cm未木质化的茎段切成5— 基上进一步增殖。研究了纽荷尔脐橙不同茎段在组织培养过程中再生能力以及PGR浓度对再 生的影响。 关键词纽荷尔脐橙茎段组织培养增殖 纽荷尔脐橙是柑橘类中的优良品种，近年来，国家水果优势区域规划和发展目标中计划 把长江上中游的宜昌一带发展成为亚洲最大的橙汁加工基地，赣南湘西桂北为亚洲最大的 优质脐橙出口基地。以这样的趋势看脐橙的发展，应用组织培养方法快速繁殖脐橙是有价 值的。柑橘类的组织培养技术研究早期主要集中在胚培养上(1964年日本西蒲昌男等， 等)，还有原生质体培养(Kochba1977年获得原生质体种苗)和茎尖的培养(1978年李耿光 利用茎尖诱导完整植株)。近年来，柑橘组织培养和细胞培养各个领域都获得了可喜的成 就，继续深入研究将可能在柑橘品种改良、无毒种苗的生产获得突破性的进展。常规的柑橘 类繁殖方法首先是繁殖枳壳做砧木，再用成年的枝梢进行嫁接，这种方法繁殖苗木虽然可以 稳定的遗传母系的优良品质，但是繁殖速度慢，而且容易感染病毒，不容易生产优质种苗。 用组织培养方法来繁殖苗木则可以大大缩短繁殖周期，而且微体繁殖可以最大程度的避免 感染病毒。组织培养方法培育苗木可以在实验室进行，最大程度的节省了空间，而且繁殖系 数大，也节省了人力资源，不必生产砧木，节省了经济开支，另外组织培养方法还可以通过体 细胞杂交技术创造更多变异，也为遗传育种奠定了基础。 1 材料与方法 1．1材料 材料来自荆州市荆州区荆西果园已经成年挂果的纽荷尔脐橙，取未木质化的茎段4～ 5cm茎端。取精选的外植体茎段和茎尖，在超净工作台上切成5～10mm大小的茎段，分别 接种在培养基上。 1．2消毒条件 25—30min。 1．2．2外植体消毒精选的无病害的健康茎段，用自来水冲洗干净，75％酒精浸泡消 ·194· 第四部分试验研究与进展 1．2．3培养室消毒用空气消毒液喷洒实验室，紫光灯照射30min。 1．3培养基及培养条件 BA0．1+NAA0．05+GAO．1。培养温度：24—26℃，光照条件：12h／d。 1．4 PGR 在配置培养基时分别加入不同浓度的PGR调节在培养过程中的生长速度。其浓度控 L，IBA：0．05～3．0mg／L范围内。 1．5试验设计 试验过程中每次试验均配置2000ml培养基，平均分成90瓶。装好，预计接种270个。 初代培养时试验两个不同的PGR水平一个CK，3个不同的外植体共90个不同的处理。 2结果与分析 2．1初代培养 接种后在第7天左右就开始有外植体基部膨大的现象，并且少数出现淡绿色的突起增 殖点，到第12天左右就有少数出现了新芽的萌发，在第23天左右萌发已经基本完 成(表1)。 表1不同外檀体初代培养的不同效果 在接种15—23天期间进行观察发现所处理的外植体存活随NAA的浓度提高而提高， 出现基部发黑或断开。而低于0．1mg／L则效果不明显。在此过程中发现带顶芽的茎段分化 最好，但是不如带侧芽的分化粗壮，不带芽的分化最差，最终确定NAA浓度为：0．2—0．4 据激素理论应该在带侧芽的稍加重NAA水平，带顶芽的稍加重6．BA含量。 2．2继代培养 继代培养是初代培养之后的连续数代的扩繁殖培养过程。旨在繁殖出相当数量的无根 苗，最后达到一边繁殖一边生根的目的。继代培养的后代是按几何级数增加的过程。在本 试验中为了节省仅进行了一次的增殖，在试验中发现带侧芽的处理比带顶芽的处理增殖效 果要好(表2)，继代培养的第10天左右长出新芽。 ·195· 品牌与现代高效果业 3 小结 (1)初代培养过程中顶芽茎段的增殖分化优势明显高于侧芽茎段的生长。(2)带侧芽 的茎段比带顶芽的茎段增殖效果好。 参考文献 1徐小勇，刘继红，邓秀新．柑橘生物技术研究进展[J]．中国生物工程杂志．