一株非典型解脲棒杆菌的临床分离与鉴定.docVIP

精品论文 参考文献 一株非典型解脲棒杆菌的临床分离与鉴定 何永文1 屈平华2 张妮3 杨雅超1 袁慧3 陈茶2 （ 1 广东省广州市番禺区石楼人民医院 广东广州 511447） （ 2 广东省中医院检验医学部 广东广州 5 1 0 0 0 6 ） （ 3 广东中医药大学第二临床医学院在读研究生 广东广州 510006） 【摘要】目的 对一泌尿系统感染患者进行病原菌的分离及菌种鉴定。方法 按《全国临床检验操作规程》第三版的方法进行中段尿的分离培养与菌落计数。以商品化Vitek2 细菌鉴定系统、德灵Autoscan -4 阳性菌PC20 复合鉴定板、API Staph、API Coryn 鉴定试条、K-B 法药敏实验、以及细菌的16S 核糖体核糖核酸（rRNA） 基因测序分析对分离的病原菌进行多相分类学鉴定。结果 该泌尿系统感染患者中累计9 次均分离到一种革兰阳性球菌，菌落计数均＞ 5 万cfu/ml，其血平板不溶血，触酶、脲酶、碱性磷酸酶均阳性，硝酸盐还原、明胶液化、葡萄糖发酵、麦芽糖发酵、蔗糖发酵等阴性，药敏分析显示对青霉素、苯唑青霉素、复方新诺明、利福平、环丙沙星、氧氟沙星、庆大霉素等耐药，但采用API Staph、Autoscan-4 PC20、Vitek2 GP67 鉴定卡均无法鉴定。16S rRNA 基因序列分析显示与解脲棒杆菌模式菌种的相似度为100%，可鉴定为解脲棒杆菌，其脂质需求实验阳性，生化特征及耐药性亦符合解脲棒杆菌的特征，但其球状的菌体形态与典型解脲棒杆菌的“栅栏状排列”小杆菌存在明显的差异。结论 该泌尿系统感染的病原菌可能为解脲棒杆菌的一个新的变种。 【关键词】棒杆菌 尿路感染 序列分析 【中图分类号】R379.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）08-0035-03 棒杆菌（Corynebacterium）是—种需氧生长、不产生芽孢、抗酸染色阴性、革兰阳性杆菌，隶属于放线菌属目的棒状菌科，目前已发现有100 余个种和亚种，其中与临床相关的菌种多达40 多个[1]。近年来， 由棒杆菌引起内源性感染的临床报道呈上升趋势，然而，由于棒杆菌种类繁多，确切的分类与鉴定较为困难。通常，根据棒杆菌对脂质的需求， 可将其分为脂质需求性和非脂质需求性棒杆菌两大类。就现有的研究资料来看，大多数棒杆菌为非脂质需求性，其能在普通的血平板生长良好， 菌落直径通常大于2 mm；少数为脂质需求性棒杆菌，如杰氏棒杆菌（C. jeikeium）、拥挤棒杆菌（C. accolens）、麦氏棒杆菌（Corynebacterium macginleyi）等，其对于脂质具有特定的需求，在不含脂质的普通血平板上的菌落直径通常小于0.5 m m，但在添加0.1 ～ 1%（V / V）吐温80 的血平板上的菌落直径则可以达2 mm 以上[2]。 解脲棒杆菌（C. urealyticum）为脂质需求性棒杆菌中的一种，正常存在于人类皮肤和黏膜，主要在免疫力低下人群、或长期使用抗生素治疗的老年住院患者中引起感染，可引起泌尿系统疾病如急性膀胱炎、肾盂肾炎、结痂性膀胱炎、溃疡结痂性肾盂炎、结石等泌尿系统疾病， 此外，还可引起软组织感染、伤口感染、败血症、骨髓炎、心内膜炎、肺炎等多种疾病[3]。2012 年2 月，在我医院一病人尿液中多次分离的一株革兰阳性杆菌进行鉴定，最终确定了一例非典型解脲棒杆菌引起泌尿系统感染，现报道如下。 1.对象与方法 1.1 对象/ 病例摘要：某高龄女，89 岁，长期卧床，因反复咳痰、气喘加重入院，有肺部感染、慢性阻塞性肺病、急性左心衰、高血压病、食道裂孔疝等基础病史，及股骨颈骨折、结肠癌根治等手术史。入院体检： 体温36.5℃，脉博81 次/ 分，血压178/118m m H g。血常规：WB C 11.7times;109/L，N 79.6%，Hb 107 g/L。留置导管导尿2 周，有尿路感染指征，尿常规：白细胞阳性（++）、红细胞阳性（+++）。尿培养分离到解脲棒杆菌，采用氧氟沙星、头孢呋辛均未见效果，更换留置导管， 换用利奈唑胺治疗后白细胞消失，复检尿培养无菌生长，出院后愈后良好。 1.2 仪器与试剂：TE 9600 基因扩增仪（珠海黑马公司）；恒温金属浴器（杭州博日公司）；Baso 快速革兰染色液；Autoscan -4 半自动细菌鉴定系统与配套的PC20 鉴定卡（美国德灵）；Vitek2 细菌鉴定系统与配套的GP67 鉴定卡（法国梅里埃）；API Staph 与API Coryn 鉴定试条（法国梅里埃）；Premix Ex Taq 酶体系（大连Takara）, 抗生素药敏纸片（Oxoid）。细菌分离培养基