纤维素内切酶Ⅲ再折叠过程中存在中间体.pdfVIP

2012年 3月 四川大学学报 (自然科学版) M ar． 2012 第 49卷 第 2期 JournalofSichuanUniversity (NaturalScienceEdition) Vo1．49 No．2 doi：103969／j．issn．0490-6756．2012．02．034 纤维素 内切酶Ⅲ再折叠过程 中存在 中间体 李 丹，蒋 彦 (四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064) 摘 要 ：本文研 究了尿素变性的纤维素 内切酶Ⅲ的再折叠．通过更灵敏的方法一相 图法，本研 究发现在 2mol／L~4mol／L尿素间，纤维素 内切酶Ⅲ的再折叠过程中存在至少一个中间体 ， 聚沉曲线也进一步验证 了此 中间体的存在．该中间体的存在个数可进一步通过蛋 白动力学曲 线得 以确 定． 关键词 ：纤维素 内切酶 ；相图；再折叠；中间体 中图分类号：Q814 文献标识码 ：A 文章编号 ：0490—6756(2012)02—0441—07 Existenceofan interm ediatein therefoldingprocess 0fEndoglucanasesⅢ L Dan．JAN(r、Y／n (KeyLaboratoryofBio-recoursesandEco—environmentofMinistryofEducation， CollogeofLifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China) Abstract：Proteinrefoldingisoneofthemostperplexingproblemsinmolecularbiology．Theproteinre— foldingprocessofendoglucanasesⅢ wasstudiedinthispaper．Itwasfoundthatthereisatransition statebetween2mol／Land4mol／Lureaduringitsrefoldingthroughamoresensitivemethod-phasedia- gram，whichiSdifferentfrom theresultsUshaArunachalam hadeverreported．Theexistenceofthe transitionstatehasbeenconfirmed through aggregationmeasurements．Futurestudywillfocuson the numberoftheintermediatesthroughkineticstudy． Keywords：endoglucanases，phasediagram ，refolding，intermediate canases(EC．3．2．1．4)，cel1obiohvdro1ases(EC． 1 Introduction 3．2．1．91)andB—glucosidases (EC．3．2．1．21)． Celluloseistheprimaryproductofphotosyn— Theendoglucanases (EG)areabletohydrolyze thesisin terrestria1environments。and themost soluble，substitutedcellulosessuchascarboxym— abundantrenewablebioresourceproduce