甘蔗叶片蛋白质组双向电泳技术优化.pdf

第 27卷 第 1期 福建师范大学学报 (自然科学版) Vo1．27 No．1 2011年 1月 JournalofFujianNormalUniversity (NaturalScienceEdition) Jan．2011 文章编号：1000—5277(2011)01—0080—05 甘蔗叶片蛋 白质组双向电泳技术优化 张 燕 ，何文锦 ，u，叶冰莹 ，陈由强1,2,3，陈如凯2 (1．福建师范大学生命科学学院，福建 福州 350108； 2．农业部甘蔗遗传改 良重点开放实验室，福建 福州 350108； 3．福建省发育与神经生物学重点实验室，福建 福州 350108) 摘要 ：为 了建立适合甘蔗叶片蛋 白质组研究的双 向电泳技术 ，对甘蔗叶蛋 白质 的溶解方法、IEF电泳、上 样量等关键步骤进行了优化．结果表明：裂解液中有 2mmol／L的硫脲才能更充分地溶解蛋白；上样量 1．0 mg时得到质量较好的凝胶图谱；甘蔗叶片蛋 白质主要分布在pH4～7范围．通过对甘蔗叶片蛋 白双向电泳技 术的优化，提高了双向电泳图谱分辨率和蛋 白点数，建立 了一套适用于甘蔗叶片蛋 白质组分析的双向电泳 (2一DE)方法 ，为甘蔗糖代谢相关的差异蛋 白质组学研究提供参考． 关键词 ：甘蔗；叶；蛋 白质组；双向电泳 中图分类号 ：Q503 文献标识码：A OptimizationofTwo-dimensionalPolyaneylamideGel Electroph0resisforProteomeofSugarcaneLeaves ZHANG Yan’。，HEwen—jin’。，YEBing—ying，。， CHEN You—qiang ’。 。CHEN Ru—kai (1．CollegeofL Sciences，FujianNormalUniversity，Fuzhou350108，China； 2．KeyLaboratoryofSugarcaneGeneticsandBreeding，MinistryofAgriculture，Fuzhou350108，China； 3．FujianKeyLaboratoryofDevelopmentalandNeuroBiology， FujianNormalUniversity，Fuzhou350108，China) Abstract：A two—dimensionalpolyareylamidegelelectrophoresis(2D)system was establishedforproteomicstudyofsugarcane(SaccharumofficinarumL．)leaves．Theresults show thatthesystem containinglysisbufferwith2mmol／Lthioureaforcompletedissolution ofproteins，loadedproteins1．0mgforgoodproteinpatterns，sugarcaneleafmainlydistribut— edinthepH 4～ 7range．Astheoptimizationoftheexperimentalconditionson two—dimen— sionalelectrophoresis，theusefulinformationcanbeprovidedfortheproteomicsresearchof sugancaneleafduringtheperiodofglucosemetabolism accumulation． Keywords：sugarcane；leaf；proteome；two—dimensionale