紫外吸收光谱法鉴定未知样及测定苯酚的含量.doc

紫外吸收光谱法鉴定未知样及测定苯酚的含量 一、实验目的 1、掌握紫外光谱法进行物质定性、定量分析的基本原理； 2、学习UV-1700型紫外--可见分光光度计的使用方法。 二、实验原理 含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。物质结构不同对紫外及可见光的吸收具有选择性。其中，最大吸收波长λ、摩尔吸收系数ε及吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。本实验通过比较最大吸收波长和最大吸收波长与其所对应的吸光度的比值的一致性来鉴定化合物，我们首先从文献上查得这3种物质的紫外紫外吸收光谱数据，现如下表所列。 物质 λmax/nm εmax/[L/(mol·cm)] εmax，λ1/εmax，λ2 溶剂 苯甲酸 230 10000 12.5 水 270 800 苯胺 230 8600 6.0 水 280 1430 苯酚 210 6200 4.3 水 270 1450 在紫外分光光度计上分别作3种物质水溶液（试液）的吸收光谱曲线，再由曲线上找出λmax与其对应的吸光度的比值，与表上所列数据进行对照，再比较λmax及吸光度比值是否一致，即可判断是何种物质。 由于在λmax处吸光度A有最大值，在此波长下A随浓度的变化最为明显，方法的灵敏度最大，故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液（试液）的吸收光谱曲线，再由曲线上找出λmax，据此对物质进行定量分析。 用紫外分光光度计进行定量分析时，若被分析物质浓度太低或太高，可使透光率的读数扩展10倍或缩小10倍，有利于低浓度或高浓度的分析，其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εbc。 三、仪器与试剂 （1）仪器：UV-1700型紫外-可见分光光度计；1cm石英吸收池2个；50mL比色管5支；5mL、10mL移液管各1支；25mL容量瓶6个；100mL、250mL烧杯各1个；吸耳球2个。 （2）试剂：苯酚标准溶液：100mg/L；待测苯酚样品溶液（未知浓度） ????? ??? ?样品溶液：A液、B液、C液（浓度为3×10-3mol/L） 四、实验内容与步骤 1、定性分析 (1)分析溶液的配制 用移液管准确移取1mL未知液B液于25mL容量瓶中，用去离子水稀释至25mL刻度，摇匀。取5个25mL的容量瓶，用移液管分别准确加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL浓度为100mg/L的苯酚标准溶液，用去离子水稀释至25mL刻度，摇匀。实验数据记录于标准表中。 (2)鉴定——确定最大吸收波长 取移液管准确移取1mL未知液B液于25mL容量瓶中，用去离子水稀释至25mL刻度，摇匀。取稀释后的未知液B液，在UV-1700型紫外-可见分光光度计上，用1cm石英吸收池，去离子水作参比溶液，在200~330nm波长范围内进行扫描，绘制吸收曲线。在曲线上找出λmax1、λmax2，其所对应的吸光度的比值与对应的εmax比值进行比较，鉴定B为哪种物质。 2、定量分析 (1)标准曲线的制作 取各浓度的苯酚标准溶液，用1cm石英吸收池，去离子水作参比溶液，在选定的最大波长下，按顺序从低至高浓度依次测量各溶液的吸光度，实验数据记录于标准表中。以吸光度对浓度作图，作出标准工作曲线。 (2)定量测定样品溶液中苯酚含量 准确移取10mL待测苯酚样品溶液于25mL容量瓶中，用去离子水稀释到25mL刻度，摇匀。用1cm石英吸收池，去离子水作参比溶液，在同样条件下测定其吸光度，根据吸光度在标准工作曲线上查出样品溶液中苯酚的浓度，并计算出未知液中苯酚含量。实验数据记录于样品表中。 五、数据记录及结果分析 （1）未知样的定性分析结果 物质 λmax1/nm λmax2/nm εmax1 εmax2 εmax1/εmax2 鉴定结果 未知液B 227.00 270.00 9202.1 791.4 11.6 苯甲酸 A1=1.10425，A2=0.09497， cB=3×10-3/25=1.2×10-4 mol/L A=ε·b·c b=1cm 故εmax1= A1/(b·cB)= 9202.1 εmax2= A2/(b·cB)=791.4 定性结果分析:从吸收曲线上可以看出,该物质210nm-270nm有强吸收，表示含有共轭双键。λmax1、λmax2、εmax1、εmax2、εmax1/εmax2等数据与标准表对照，数据与苯甲酸的数据基本接近，故未知液B液为苯甲酸。 （2）苯酚标准溶液和待测样品吸光度的测定结果 苯酚的量（mL） 1 2 3 4 5 未知 苯酚浓度（mg/L） 4.0000 8.0000 12.0000 16.0000 20.0000 9.8690 吸光度 0.623 0.1349 0.1912 0.2570 0.3273 0.1598