细胞生长及其核心调节因子－TOR蛋白.ppt

October the 25th 2001 How do living organisms control their size? Size control 细胞增殖 （Cell Proliferation） 细胞数量增加 400 temperature-sensitive yeast mutants Macromolecular synthesis Cell division Cell morphology cdc mutants – defects in cell division 目前研究认为－－周期蛋白依赖性激酶 (cyclin-dependent kinases,CDKs)是细胞增殖的中心调控因子。 Cell Growth: Cell Size control volume mass biosynthetic capacity 细胞生长(Cell Growth) 细胞中物质的积累，最终引起细胞体积和质量增加的过程。 细胞生长与细胞增殖间的关系 细胞生长 细胞生长不是简单的细胞体积和质量的增加，而是发生在特定的时间和地点、并受到精细调控的过程。细胞生长与细胞增殖、凋亡相互协调才能确保成为适宜的细胞、器官或个体。 成年人体内的主要化学组成 蛋白质的生物学重要性 因此，对蛋白质生物合成过程的调控是细胞生长调控的关键环节，它依赖于完善的蛋白质合成机制和细胞内、外生长信号的存在。 雷帕霉素靶(target of rapamycin, TOR) 可以整合氨基酸、能量、生长因子所激发的信号通路，是细胞生长的核心调节因子。 mTOR (the mammalian target of rapamycin) 雷帕霉素-Rapamycin 从Streptomyces hygroscopicus中分离出来； 是一种亲脂性大环内酯类抗真菌药，是FK506的类似物； 能强烈抑制多种哺乳动物细胞的增生； 是一种强烈的免疫抑制剂，有效抑制移植物排斥反应； 其类似物能抑制多种肿瘤细胞的生长； TOR 蛋白(target of rapamycin) Yeast； 由TOR1和TOR2基因编码； 分子量：280kDa； 同源性：40－60％； 在进化上高度保守的蛋白质：mTOR、dTOR、CeTOR、AtTOR mTOR (mammalian target of rapamycin) FRAP: FK506-binding protein 12(FKBP12) and rapamycin associated protein; RAFT1: rapamycin and FKBP12 target-1; RAPT1: rapamycin targer-1; SEP: sirolimus effector protein; mTOR基因定位于1号染色体短臂(1p36.2)； mTOR蛋白由2549个氨基酸组成； 分子量为289kDa； 进化上高度保守，与酵母TOR蛋白有45％的同源性，人类、小鼠、大鼠之间的氨基酸序列一致性达95％； 非典型的丝/苏氨酸蛋白激酶； 含有与PI3K和PI4K的催化结构域高度同源的激酶区 ； 属于PIKKs（phosphatidylinositol kinase related kinases ）家族； PIKKs家族包括PI3K,PI4K, MEC1, TEL1, RAD3, MEI-41, DNA-PK, ATM, ATR, and TRRAP 等，功能广泛，涉及细胞生长的调控、细胞周期、DNA损伤检查、重组和端粒酶长度的维持等； PIKKs家族激酶的功能异常会导致许多疾病，肿瘤、免疫缺陷等. Domains HEAT repeat domain：位于N端，含有20个串连排列的HEAT模体，每个HEAT模体由大约40个氨基酸组成一对反向平行的?-螺旋，这些HEAT模体形成超螺旋结构，介导蛋白质与蛋白质之间的相互作用； FRB(FKBP12-Rapamycin binding) domain：rapamycin与FKBP12形成的复合物结合于该部位，起到抑制mTOR活性的作用； FKBP12 FK506 – binding protein, MW of 12 kD FAT domain: 由500个氨基酸组成，位于FRB domain的N端。也存在于其它PIKKs家族成员分子中； FATC(FAT C-terminal) domain:位于mTOR分子C端的另一个FAT结构域； 两者经常同时存在，二者相互作用可以调节位于它们之间的激酶结构域的活性。 NRD (negative regulatory domain): 位于mTOR的第2430-2450位氨基酸残基之间。去除后mTOR的激酶活性