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实验一、生物化学实验技术简介与训练 一、目的和要求 1．了解生物化学与分子生物学实验的常见基本研究方法。 2．掌握分光光度法、层析法、电泳法和离心分离法的技术原理和应用范围以及注意事项 3．掌握标准对照法的原理和方法，并用此方法测定未知硫酸铜的浓度。 * 生化实验常用基本技术 分光光度法 层析法 电泳法 离心分离法 * 四大生化实验技术 具体可参考实验网络课程中的具体录像、动画或其他文档资料。 * CuSO4浓度的比色测定 基本原理 分光光度法进行定量分析的依据是Beer-Lambert定律A = ε ? C ? L，物质的吸光度（A）和它的浓度（C）呈线性关系。在相同条件下，配制硫酸铜标准品溶液和未知待测硫酸铜样品溶液，在λ680处分别测得A标和A样，然后根据公式计算出未知待测样品浓度：C样 = （A样/A标）* C标。 * 实验方法 以蒸馏水作空白对照，分别在680nm处测定标准样和样品的吸光度（A）值，然后根据公式计算待测样的浓度。 * 注意事项 1．使用分光光度计前，须提前开机预热，并严格按照说明书操作。 2. 比色杯放置要记下摆放顺序，请勿将毛玻璃面面对光路。 3. 重复测定或前后不同学生测定需换溶液时，须将比色杯中的残留液处理干净，避免由此引起的误差。 4. 可取多次测定结果求平均值减少误差。 * 网络作业（务必网上提交） 分光光度法中对样品的处理需要注意哪些问题？分析条件的选择有哪些注意事项？ *