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博苑生物-iTRAQ技术概况 - 生物在线Lab-on-web - 生命科学专业网.ppt

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iTRAQ概况 蛋白质组分析方法 实验流程 优点 通过肽段标记技术,使得定量准确 准确的定量技术提高了实验的重复性 可以进行多个样品的比较,提高了实验通量 与二级质谱鉴定相结合,提高了鉴定结果的可靠性 操作简便,不需要更多的烦琐操作 * * 上海博苑生物科技有限公司 2DE-MS/MS DIGE-MS/MS ICAT 蛋白芯片 MudPIT iTRAQ …….. iTRAQ(同位素标记相对和绝对定量技术):定量效果好、重复性高,可对多达四种不同样本同时进行定量分析 iTRAQ 结构设计原理 Reporter group Mass: 114 to 117 Balance group Mass: 31 to 28 Peptide Reactive Group PRG Isobaric Tag: Total Mass = 145 MS fragment site 上海博苑生物科技有限公司 4个来源不同的相同蛋白样品在一级质谱上表现相同 Balance group在二级质谱发生中性丢失 Reporter group 在二级质谱产生4个报告离子,分别是114、115、116和117 通过分析报告离子的峰强度比值就可以分析同一个蛋白在不同样品间的表达量比值 iTRAQ 结构设计原理 上海博苑生物科技有限公司 样品1 样品2 样品3 样品4 114标记 115标记 116标记 117标记 酶解 酶解 酶解 酶解 混合 数据分析 质谱 上海博苑生物科技有限公司 上海博苑生物科技有限公司 可以进行iTRAQTM 的质谱仪 4800 MALDI TOF/TOFTM Q-TRAPTM QSTARTM Elite 上海博苑生物科技有限公司 应用领域 Biomarker Discovery Signaling/Differential PTM analysis Genomic proteomic correlation Time course analysis Membrane protein analysis Lipids and phospholipids analysis 上海博苑生物科技有限公司

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