CD分子在反复呼吸道感染患儿机体中的改变.docVIP

精品论文 参考文献 CD分子在反复呼吸道感染患儿机体中的改变 杨丽娟（山东省烟台市长岛县人民医院检验科 265800） 　　【摘要】目的:检测28例RRTI患儿以及26例正常儿童外周血中CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴细胞的百分含量及CD4﹢/CD8﹢比值，以便进一步了解反复呼吸道感染患儿机体免疫功能的改变状态，为临床免疫调节治疗提供客观依据。方法：利用流式细胞仪检测28例RRTI患儿以及26例正常儿童外周血中CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴细胞的百分含量及CD4﹢/CD8﹢比值。结果：28例RRTI患儿外周血中CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴细胞的百分含量明显低于26例正常对照组儿童的百分含量，差异具有非常显著的意义(t值分别为14.41和30.14，P值均＜0.01）;而CD8﹢T淋巴细胞的百分含量则高于正常对照组儿童，差异具有显著的意义（t值为19.64，P值＜0.01）；RRTI组CD4﹢/CD8﹢比值低于对照组，差异具有显著的意义（t值为45.93，P值＜0.01）。结论：RRTI患儿细胞免疫功能异常，CD4﹢/CD8﹢比值失调，提示RRTI患儿机体内T细胞免疫功能紊乱，在积极采取病因治疗的同时，应及时调节其机体的免疫功能状态，提高其免疫能力，这对于防治RRTI具有重要意义。 　　【关键词】CD分子 反复呼吸道感染 儿童 　　【中图分类号】R725.6 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）04-0150-01 　　我院呼吸道感染占儿科门诊患儿的80%，其中30%为反复呼吸道感染，RRTI确切的发病机制尚不完全清楚，目前认为是多种因素综合作用的结果，免疫功能低下被认为是RRTI发病的主要原因之一。为进一步探索反复呼吸道感染患儿机体的免疫功能的改变，我们检测了RRTI患儿外周血中CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴细胞的百分含量及CD4﹢/CD8﹢比值，以进一步了解反复呼吸道感染患儿机体免疫功能的改变状态，为临床免疫调节治疗提供客观依据。 　　1.材料与方法 　　1.1材料 　　1.1.1标本来源 　　（1）病例组：反复呼吸道感染患儿的确定诊断，参照1987年全国小儿呼吸道疾病学术会议制定的反复呼吸道感染的诊断标准[2]，病例组选自2012年8月-2013年2月我院儿科门诊及住院患儿，共计28例，其中男15例，女13例，年龄（4.07plusmn;1.844）岁。排除与肺、气管及心脏先天性畸形、胃食管反流、贫血、佝偻病、营养不良、肿瘤等引起的呼吸道感染，并且近3月内使用过免疫抑制剂及免疫增强剂的患儿。 　　（2）对照组：对照组儿童选自我院同期健康查体儿童，共计26例，其中男14例，女12例，年龄（4.15plusmn;1.666）岁。排除与肺、气管及心脏先天性畸形、胃食管反流、贫血、佝偻病、营养不良、肿瘤等引起的呼吸道感染，并且近3月内使用过免疫抑制剂及免疫增强剂的健康儿童。 　　两组儿童在年龄、性别、组成结构等方面比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。 　　1.1.2样本采集： 　　符合抽血标准的儿童于第二天早晨8点空腹抽静脉血5ml置于无菌促凝管中，2000r/min，离心5min，离心半径6.5cm，收集血清，抽血时要求无溶血。 　　1.2测定方法： 　　（1）实验所用仪器： 　　离心机，型号LXJ-64-01，编号1017，北京医疗仪器厂生产。 　　流式细胞仪：型号BDACSCalibur,编号342975,美国Becton Dickinson公司生产。 　　（2）实验所用试剂： 　　Mouse anti-human CD4／CD8／CD3,FITC／PE／PerCP;产地：美国；公司：BD；规格：50tests;货号：340298 　　BD FACSLysing Solution;产地：美国；公司：BD;规格：100ml;货号：349202 　　（3）测定原理：流式细胞术通过抗原抗体结合的原理，将目的抗体用具有不同波长的荧光素标记，从而间接标记细胞的抗原分子，然后检测这些荧光素标记的存在就能证实细胞抗原分子的存在，进而将细胞加以区分。 　　（4）测定步骤： 　　（4.1）将采集到的患儿及对照组儿童清晨空腹静脉血2ml，分别加到含有EDTA抗凝的真空管中，常温保存待检。 　　（4.2）在试管中分别加入CD4／CD8／CD3抗体20ul和混匀后的EDTA抗凝外周血100ml，漩涡混匀器充分混匀。 　　（4.3）室温避光孵育15分钟。 　　（4.4）加入BD FACSLysing Solution(红细胞裂解液) 2ml，轻柔充分混匀。 　　（4.5）室温避