人脑胶质瘤中p16基因的表达.docVIP

精品论文 参考文献 人脑胶质瘤中p16基因的表达 李勇 王莉华 （延边大学附属医院 吉林延吉 133000）【中图分类号】R 【文献标识码】 【文章编号】1672-5085（2010）28-0015-03【摘要】 目的探讨胶质瘤中p16基因的缺失及免疫组化情况。方法利用、PCR技术和免疫组化检测43例胶质瘤p16基因的缺失。结果PCR组：12例脑星形细胞瘤p16E1和p16E2均缺失，占28%（12/43），2例仅缺失p16E1，占5%（2/43）；p16E基因缺失多发生在Ⅲ-Ⅳ级脑星形细胞瘤中（Ⅲ级6/16，Ⅳ级8/14），Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级比较有显著性差异（Plt;0.05）。免疫组化组：p16表达缺失率为60.5%。P16表达缺失在Ⅲ级（43.6%）、Ⅳ级（85.7%）脑胶质瘤中显著高于Ⅰ-Ⅱ级（22.2%）（Plt;0.05）。结论 p16基因失活可能与脑星形细胞瘤的分化程度有关，p16基因缺失是p16基因失活的主要机制。【关键词】 脑肿瘤 p16基因 聚合酶链反应 免疫组织化学 Expression of p16 gene in human brain tumors LI Yong.Departmant of Neurosurgery, Affiliated Hospital of Yanban University, Yanji 133000, Jilin, China 【Abstract】 Objective To investigate the deletion and immunohistochemistry of p16 gene in brain tumors.【Methods】 The deletion and immunohistochemistry of p16 gene were detected by PCR and PCR based methylation methods in 43 cases of brain tumors.Results PCR grup:The ratio of homozygous deletion of p16E1 and p16E2 gene was 28%（12/43），p16E1 was 5%（2/43）instrocytomas;more of p16E1 and p16E2 gene deletion was found in high-grade astrocytomas（garade Ⅲ6/16, garade Ⅳ8/14），there was significant differenceamong different grades of astrocytomas（Plt;0.05）. Immunohistochemistry grup:The negative rate of p16 was 60.5%.The negative rate of p16 gene was 43.6% in grade Ⅲ,under same circumstances it was 85.7% in grade Ⅳ。Conclusion The deletion of p16 gene may be associated with difference degree of astrocytomas,and the deletion of p16 gene was the major mechanism for devitelization p16 gene. 【Key words】Brain tumor Gene p16 PCR immunohistochemistry 1 材料与方法 1材料与试剂43例脑胶质瘤病例来源于2008年1月至2009年12月延边大学医院脑胶质瘤手术患者血样及病例标本。Ⅰ级6例，Ⅱ级7例，Ⅲ级16例，Ⅳ级14例。 1.2 试验方法 2.1PCR扩增及条件：利用PCR技术检测p16基因外显子1.2(p16E1、p16E2)缺失。根据Maesawat等 [1]文献设计P16E1、P16E2引物，3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因作为内对照，由华美生物有限公司合成（见表1）。PCR总反应体系，含模板底物10mu;l、上下引物(10pmol/mu;l)各5mu;l、10times;buffer5mu;l、1.5mmol/LMgCl 22mu;l、0.2mmol/LdNTP 1mu;l、Taq酶2mu;l、水20mu;l、石蜡油50mu;l。反应条件：预变性95℃5min,退火30s（退火温度各引物不同，见表1），72℃延伸35s。PCR反应产物经20g/L的琼