微生物传感器在污染物生物毒性分析中的应用研究.pdfVIP

#燃黎5。}一嚣瑚獬镕㈤，臻 ±苎!竺苎墨墨垒苎!!!鬣l。一；㈣。 微生物传感器在污染物生物毒性分析中的应用 赵红宁王学江夏四清 引言 随着工业化程度的升高以及对化工产品的极大需求，各种化学物质数量猛增，给人类生存环境 造成很大影响，迫切需要对日益增多的环境污染物进行急性毒性鉴定。传统的化学分析方法虽能准 确定量分析污染物中主要成分的含量，但不能直接反映各种有毒物质对环境和生物的综合影响。传 统的生物毒性监测以水蚤、藻类或鱼类等为受试对象，虽然能反映毒物对生物的直接影响，但是这 些方法的最大缺点是实验周期长，操作复杂，不能及时反映水质情况。近年来，随着微生物固定化 技术的发展，微生物传感器的研究和应用取得很大进展。开发了使用固定化微生物的各种传感器， 如发光型微生物传感器、硝化细菌传感器、全细胞微生物传感器等用于水质分析。这些传感器以很 高的灵敏度对各种污染物的浓度进行监测，而且具有简便、快速、灵敏、经济等优点，在环境监测 中应用前景十分广阔。本文综述近年来微生物传感器在污染物生物毒性分析中的应用研究进展。 1微生物传感器工作原理 微生物在利用物质进行呼吸或代谢的过程中，将消耗溶液中的溶解氧或产生一些电活性物质。 在微生物的数量和活性保持不变的情况下，其所消耗的溶解氧量或所产生的电活性物质的量反映了 被检测物质的量，再借助气体敏感膜电极(如溶解氧电极、氨电极、二氧化碳电极、硫化氢电极)或 离子选择电极(如pH玻璃电极)以及微生物燃料电池检测溶解氧和电活性物质的变化，就可求得待 测物质的量，这是微生物传感器的一般原理。 微生物传感器主要由两部分组成：第一部分是微生物膜，此膜是由微生物与基质(如醋酸纤维素 等)以一定的方式固化形成；第二部分是信号转换器(如02电极、气敏电极或离子选择电极等)。将 这两部分耦合便可构成微生物传感器。 2微生物传感器的分类与生物毒性检测 根据微生物的种类分类，目前，研究的生物毒性分析微生物传感器有以下几类： 2．1发光微生物(1uminousmicrobes)传感器 发光微生物指自然界存在、细胞内具有生物发光代谢系统的原核和真核微生物，近来还包括导 入发光基因而使原本不发光的微生物具备发光特性的基因工程发光微生物。发光微生物毒性测试中 应用最多的是明亮发光杆菌，可以检测各种水体中的有毒物质，对于气体中可溶性有毒物质，可通 过把它吸收、溶解在溶液中，然后观察其对发光细菌的影响。应用发光微生物进行生物毒性分析有 显著优点：操作无需严格无菌；发光变化先于基本代谢变化因而对毒性更为敏感；与光电检测手段 相结合，自动化程度高、结果客观、人为误差少。 发光细菌的毒性测量实验基于一下原理： 三二；鬟銎：±苎!楚苎叁丛兰!!! 正常生理状况下，在氧气与细菌荧光素酶的参与下，细胞可发出波长为420-一670nm的可见光。 如果有有毒物质存在，会抑制酶的活性，使发光量降低，其减弱的程度与毒物的毒性大小和浓度成负 相关，因而可以根据发光菌发光强度判断毒物毒性大小，用发光强度表征毒物所在环境的急性毒性。 ‘闫鹏等人【1】以明亮发光杆菌为生物识别元件，以硅光电二极管作为细胞光信号和电信号转换的 性进行快速检测研究，同时和哺乳动物毒性实验结果做对比。．毒性测试结果表明，在pH=7．0，温 测试结果的EC50值与哺乳动物毒性试验的LD50具有良好的相关性，相关系数r=0．95。 张理兵等人【2】采用光纤探头结构、以明亮发光杆菌作为指示物制作了光纤式发光菌传感器，以 用国标推荐的方法测得的结果有很好的一致性。 此外，发光细菌法也可用于土壤、大气、固体废渣、蔬菜农药残留的环境生物毒性监测，适用 于大批量化合物和样品的初筛，在环境监督管理中有广泛的应用前景，对控制环境的毒物污染和强 化工业污染源的管理很有裨益，并且可以为污染事故处理提供有效手段。 bacteria)传感器 2．2硝化细菌(nitrifying 硝化细菌是一群化能自养型细菌，从氧化NH3及HN02中取得能量，以C02为