中药提取物逆转肿瘤细胞多药耐药性实验研究.pdfVIP

II 态结果未显示)，Hela细胞经10gDT处理6小时后，微管蛋白骨架网状结构消失，表明该化合物能促 进微管蛋白解聚。 3．讨论 DT化合物是从中药中分离提取的生物碱，细胞水平实验已证实DT化合物对多种人体癌细胞增殖有 很强的抑制活性，为进一步了解DT的抗肿瘤活性，观察该化合物对小鼠肿瘤生长的抑制作用、探讨该化 合物的抗肿瘤作用机制，分别对DT进行了小鼠体内抗肿瘤实验和对人体肿瘤细胞微管作用的研究。从 DT化合物的毒性实验观察中发现，各浓度DT组以不同方式连续用药后小鼠活动和摄食量减少，腹腔注 射给药后毒性反应比灌胃明显，对各实验组进行终末与开始体重差统计发现，Drr组小鼠体重比对照组低， 且高浓度DT组体重降低明显，表明该化合物经连续给药对小鼠体重影响较大，解剖后肉眼观察到小鼠肠 管内容物较少，提示该化合物可能对消化系统有一定影响；对化合物DT进行小鼠移植性肿瘤的研究结果 显示：经腹腔注射DT后，能延长S-∞腹水瘤小鼠的生存天数；连续灌胃给药后，化合物DT对小鼠移植 性肿瘤S瑚有明显抑制作用，两个浓度组的瘤重与对照组相比均有非常显著的差异，该作用具有浓度依 赖性：在给接种人胃癌BGC一823后对肿瘤良好生长的裸鼠进行注射给药后，高浓度DT对人胃癌裸鼠异种 移植性肿瘤生长有明显抑制作用，对肿瘤的抑制与对照组比较有显著差异，从给药期间瘤体积的变化中 发现，随着给药时间的延长，DT减缓肿瘤生长的作用不断加强。在Drr抗肿瘤作用机理的初步研究中发 现，该化合物能促进微管蛋白解聚，由此推测Drr对肿瘤细胞的生长抑制作用与其解聚细胞骨架蛋白有关。 由于微管是由不同的微管蛋白和微管相关蛋白组成，其聚合与解聚的动态不稳定性也受到许多因素的影 响，因此DT通过促进微管解聚以抑制肿瘤细胞增殖的作用机理仍需进一步研究。 总之，通过连续口服灌胃、腹腔注射给药，化合物Drr对小鼠移植性肿瘤S。∞、异种移植肿瘤BGC均 具有较强抑制作用，并可使S，舳腹水瘤的生存天数明显延长，我们将继续观察Err对其他肿瘤生长的作用， 以及对抗肿瘤作用的机制进行更深入研究。另外该化合物在高浓度用药后使小鼠体重降低的毒性作用， 我们仍需进一步探讨对该化合物的结构改造，从该类化合物中筛选和确定出抗肿瘤活性较强且毒性低的 具有开发潜力的抗肿瘤候选药。 中药提取物逆转肿瘤细胞多药耐药性实验· 刘菽秋，阳 勇，苏 芝，屈 艺，高小平，唐心曜，刘柏林6 (四川大学华西基础医学与法医学院，四川610041) 目前恶性肿瘤化疗失败的主要原因是肿瘤细胞对抗癌药物产生多药耐药性(Multidrugresistance， MDR)所致。为此探寻可逆转或阻断MDR的途径，即把耐药性癌细胞转变为对药物敏感的细胞，从而最有 效提高现有抗癌药物疗效，已成为人们观注的热点。我们在已有工作基础上，进一步用筛选获得的中药 提取物U．-26和U。-35对三种肿瘤耐药细胞株进行了逆转MDR试验，报道如下： · · 531 1．材料与方法 1．1主要材料和试剂 及药敏株A549自本校附属华西一医院。 1．1．2试剂RPMI (Sulforhodamine 限公司)，紫杉醇(北京四环医药科技公司)，顺铂(山东齐鲁制药厂)，鬼臼乙叉甙()，异博定(江 苏连云港制药厂)。 1．1．3中药提取物U,-26和U,-35属生物碱类近纯品混合物，由本项目组分离制备。 1．2细胞培养及耐药性测定 上述各耐药／敏感细胞株对，分别按常规复苏传代培养。各耐药细胞的培养基中添加相应一定量的抗 癌药以维护／强化耐药性。并按耐药细胞G150与敏感细胞G150比值计算耐药倍数，直至细胞生长稳定， 耐药倍数达到要求为止。 1．3逆转倍数测定 上述白血病细胞株(悬浮生长)按M1vr法，其余细胞株按SRB法测定。即取对数生长期细胞，按一 oD调零用)不加细胞；阴性对照组，不加任何药物的耐药细胞和敏感细胞组：实验组I，敏感细胞加中 药(不同浓度梯度)、敏感细胞加VRP(不同浓度梯度)；实验组Ⅱ，耐药细胞只加中药(不同浓度梯度)、 血病细胞按MTT法测各孔oD。∞值，