糖多孢红霉菌突变体M生物合成3脱氧3羰基红霉内酯B的限速因子研讨.pdfVIP

摘 要 糖多孢红霉菌 M 突变体 DOEB 生物合成限 速因子的研究 摘 要 红霉素(erythromycin, Er)是糖多孢红霉菌(Saccharopolyspora erythraea) 的次 生代谢产物，为一类广谱大环内酯类抗生素。近几年上市的第三代大环内酯类 红霉素及其衍生物 （又称为酮内酯类抗生素 ketolide antibiotics ） ，因具有较高 的抗菌活性和显著的抑制呼吸道耐药菌株活性而具有广阔的开发前景。为探寻 经基因工程途径直接改造糖多孢红霉菌的染色体结构而合成的新酮内酯类化合 物 DOEB 产量大大下降的原因，本文以糖多孢红霉菌突变体M 为研究对象，分 别从基因的转录水平、翻译水平和内酯类化合物前体水平，系统研究了糖多孢 红霉菌 M 合成 DOEB 的限速因子。研究结果如下： 在mRNA 稳定性研究中，首先提取、纯化糖多孢红霉菌总RNA ，进行mRNA 反转录，以获得的cDNA 为模板，采用 ABI real-time quantitive 7500 仪器进行 PCR 扩增，实时监测扩增产物量