重组大肠杆菌VG1pTU14产PHB的补料分批培养.PDFVIP

维普资讯 第53卷 第 7期 化 工 学 报 V01．53 №7 2002年 7月 Journalof Chemical Industry and Engineering (China) July 2002 重组大肠杆菌 VG1(pTU14)产 PHB的补料分批培养 于慧敏 张延平 史 悦 杨胜利 沈忠耀 (清华大学化学工程系，北京 100084；中国科学院上海生物工程研究中心，上海 200233) 摘 要 利用已构建的同时含有透 明颤菌血红蛋 白基 因(vgb)、 噬菌体裂解基 因(S-RRz)和 PHB合成基因 (phbCAB)的产PHB基因工程大肠杆菌 VG1(pTU14)，在 5L发酵罐里进行补料分批培养．研究发现：碳氮比 (C／N)，DO(溶氧)及碳源和氮源的浓度是影响菌体生长和 PHB积累的重要因素；补料时间可以通过DO和 pH 值两个参数的变化在线综合识别；流加策略应使发酵前期菌体大量生长，发酵后期 PHB大量积累．在优化条件 下，对 VG1(pTU14)进行 60h的补料分批培养 ，菌体细胞浓度、PHB浓度和PHB占细胞干质的分数分别高达 215．9g·L～、193．7g·L一和 89．7％． 关键词 透明颤菌血红蛋白基因 噬菌体裂解基因 聚 一羟基丁酸酯 补料分批培养 中图分类号 TQ929 ，文献标识码 A 文章编号 0438—1157 (2002)07—0742—05 PRODUCTIONOFPOLY—J8一『HYDROXYBUTYRATEBY FED—BArrCH CULTURE oFNovEL REC0Ⅷl INANT EscherichiacoliVG1(pTU14) YU HuiminI。ZHANG Yanping~。SHIYueI。YANG Shengli2andSHEN Zhongyao1 (DepartmentofChemicalEngineering，TsinghuaUniversity，Beijing100084，China； 2ShanghaiResearchCenterofBiotechnology，AcademciSincia，Shanghai200233，hCina ) Abstract VG1(pTU14)isanovelrecombinantEscherichiacoliforPoly一 一hydroxybutyrate(PH ) production，whichocntainsVitreoscillahemoglobingene(vgb)，lyticgenesofphage (S_RR )andP船 biosyntheticgenes (肋6CAB)inthecel1．Duringtheprocessoffed—batchcultureofVG1(pTU14)，itwas foundthatthelevelofdissolvedoxygen (DO)，theocncentrationratio (CAX1)nadtherangeofcarbonnad nitrogensourcewereallimportnatparametersaffectingcellgrowthna dPHBaccumulation．DO andpH oculdbe usedtodecidethetimeforthenutritionfeeding ．W henC ．carbonnadnitrogenocncentrationwereinthe rnageof10- 20，1o--40gL‘_。，1．O一 2．Og L‘ respectivelynadDo washigherthna 5％ ，thecellgrowth wa