基因工程日常班学生.ppt

基因工程日常班学生

1、研究基因原始结构、功能分析或发现研究非表达基因或研究所有基因的识别工作等可用基因组文库 2、获得某基因后,合成的蛋白质或多肽用于生物制药或研究某基因结构功能调节或研究生物进化与同源性分析需建立cDNA文库 3、较短的基因片段或合成探针可用人工合成 4、诊断变异基因、合成特异基因、合成特异探针可用PCR(不用于特异目的基因结构分析因扩增错误几率较高) 5、研究细胞增殖、分化机理或细胞对外因反应分子机理等用差异文库 6、同上或发现异常基因并将其再经PCR扩增获得目的基因,可用mRNA差异显示法 1、基因组基因片段大,基因组含大量重复单位和不表达单位,真正表达的基因只占小部分,导致构建文库困难,筛选目的基因难度大;另外这类基因若用于表达,只能在真核细胞(原核细胞表达体系缺乏转录后修饰酶);但该文库包含该物种所有遗传信息,可筛选任何基因 2、cDNA文库包含所有mRNA的基因,筛选的基因只限于正在表达的基因;另外不同组织细胞基因表达有差异,导致不同组织细胞构建cDNA文库不同 3、PCR获得目的基因简便、快捷,但需要有与基因互补的5’、3’端两种引物,常用于检测特异基因 、突变基因等 4、可测知基因碱基序列的短基因或基因片段可用人工合成方法获得 1、cDNA文库目前已有商品出售,构建cDNA文库在具有一定规模的分子生物学实验室可做到 2、PCR扩增仪、核酸自动合成仪 几种获得目

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