第09章 免疫标记技术.pptVIP

第九章 免疫标记技术 ; 根据抗原抗体结合的特异性和标记分子的敏感性建立的技术，称免疫标记技术。 ( immunolabelling technique) ; 高敏感性的标记分子主要有荧光素、酶、放射性同位素，由此建立了免疫荧光技术、免疫酶技术和放射免疫分析等技术。 特点：敏感性高、特异性强 应用：微生物鉴定、传染病诊断、生物活性物质的测定、基因表达产物的检测。;第一节 免疫荧光抗体技术; 当发现异硫氰酸荧光素（FITC）被发现后，以及荧光抗体纯化技术的发展，显著提高了荧光抗体技术的敏感性和特异性，故得到广泛应用。 用于病原检测、疫病诊断等;2 荧光素 为一种化学染料。常用于标记的荧光素有：异硫氰酸荧光素（FITC）、四乙基罗丹明（RB 200）、四甲基异硫氰酸罗丹明，其中FITC最常用。 ;作为标记荧光素需满足的条件： （1）有与蛋白分子形成稳定共价键的化学基团，且不形成有害产物。 （2）荧光效率高，与蛋白结合的需要量小。 （3）标记后不影响抗体的活性 （4）性质稳定，易保存 （5）激发的荧光与背景颜色有良好的反差。 （6）标记简单，能形成商品;3 荧光抗体染色方法 （1）标本制备 涂片或亚印片：细菌培养物、感染动物的组织、血液、脓汁 切片：感染组织 盖玻片：上面培养单层细胞 标本要求很薄，并要保持抗原的完整性;（2）固定