A.TB综合科室.ppt

L/O/G/O 结核杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂盒（酶联免疫法） 海口维瑅瑷生物研究院 王浩宇 A.TB 结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，简称结核杆菌）引起，主要通过呼吸道传播，亦可经消化道或皮肤表皮创伤传播；可累及身体任何部位，肺结核是主要表现形式。 感染结核杆菌后的三种结局 免疫清除 潜伏性结核（无症状、无传染性、 终生，存在激活风险） 活动性结核（排菌，传染源） Scanning electron micrograph of Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium tuberculosis colonies 来源： 结核感染 感染人数：全球约20亿，中国约5.5亿 患病人数：活动性病人全球约2000万，中国约499万2 年新增病例全球约800-1000万，中国约130万2 死亡人数：每年死亡病例全球约300万，中国约5.4万2 中国是全球22个结核病高负担国家之一 结核病疫情1 早期活动性结核诊断 细菌学检查：涂片、培养、病理活检。临床上菌阴结核病例约70％-80%，大部分结核患者检验敏感性低。 细菌学诊断 抗酸杆菌染色（AFB） 分枝杆菌培养 ——标准的结核病细菌学检查 “三涂一培” 结核抗体检查：检验窗口期3-6个月，不适合早期诊断。抗体半衰期长，不能反映即时病情。 早期活动性结核诊断 结核抗体检测 用已知的结核抗原来检测待检标本中的未知的结核抗体。 常用的检测方法： 酶连免疫吸附试验 斑点免疫渗滤试验 免疫层析试验 免疫印迹试验 γ干扰素释放分析技术（IGRA） 基本原理1 机体感染结核杆菌后产生的T细胞在体外受到特异性抗原刺激时，会释放γ干扰素，通过对γ干扰素的定量分析可判断是否具有结核杆菌的特异性T细胞反应。 key words：记忆性细胞免疫、体外全血培养、γ干扰素 特异性结核抗原1 基因组RD1区编码的ESAT6和CFP10抗原，在所有卡介苗菌株和绝大多数非结核分枝杆菌中不存在。 Andersen, P., M. E. Munk, et al. (2000). Specific immune-based diagnosis of tuberculosis. Lancet 356(9235): 1099-1104. γ干扰素释放分析技术（IGRA） 结核杆菌 进入体内（细胞内寄生） 特异性淋巴细胞 定量检测 IFN-? 特异性抗原 释放细胞因子 IFN-? A.TB —IGRA与哈佛专利的结合 技术平台[专利：美国7754219，中国 ZL 02 8 10886.8] 合成肽抗原加载技术1（OPPL） 抗原特异性激活的细胞免疫技术2,3（ASACIR，A.TB使用专利 ） proteasomes MHC-1 MHC-2 peptides TAP APC 脱毒的炭疽毒素致死因子（LFn）融合蛋白 T细胞 A.TB与早期活动性结核诊断方法比较 优势： 1.无需带菌标本（痰培养、痰涂片、PCR需要，早期患者75%无法获得带菌标本） 2.适用于早期快速诊断,两天便可出结果（痰培养耗时太长，胸片早期难诊断） 3.灵敏度高（痰培养、痰涂片、胸片、结核抗体、TST均无法达到同等检验精度） 4.不受卡介苗影响（TST与卡介苗交叉反应） 5.窗口期短，仅为感染后1-2周即可检验（结核抗体检验窗口期为3-6个月） 6.阳性结果反映现症感染。 A.TB检验样本采集要求 采血量：不低于3ml。 抗凝要求：肝素钠或者肝素锂抗凝。为充分抗凝以保证细胞活性，在采血后即刻颠倒混匀。 采集样本保存要求：全血样本室温（25℃±5℃）保存。在全血离体16小时内送到检验室完成样本前处理。 如何应用A.TB——呼吸科 早期活动性肺结核辅助诊断。 非结核胸肺部疾病（肺癌，肺炎，肺囊肿，支气管炎扩张等疾病）与肺结核的鉴别诊断。 结核性胸膜炎/腹膜炎早期诊断。 风湿免疫科 药物治疗是主要的治疗方式，特别是生物制剂（即选择性地以参与免疫反应或炎症过程的分子或受体为靶目标的单克隆抗体或天然抑制分子的重组产物） 英夫利昔单抗——类克 依那西普——恩利 阿达木单抗——Humira 利妥昔单抗注射液——美罗华 生物制剂用于免疫介导炎症性疾病治疗的结核风险 根据美国食品药品管理局（FDA）和其他机构的统计，生物制剂的使用容易出现合并感染及