尿液蛋白质电泳在临床诊断肾脏疾病方面的应用探讨.docVIP

精品论文 参考文献 尿液蛋白质电泳在临床诊断肾脏疾病方面的应用探讨 夏伏来 （江苏省淮安市淮安区淮城镇卫生院223200） 【摘要】目的：探讨尿液蛋白质电泳在诊断肾脏疾病方面的临床应用。方法：对120 例肾脏疾病患者的尿液标本采用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶进行非浓缩尿蛋白电泳分析。结果：经尿蛋白电泳扫描结果显示120例非浓缩尿液标本中，肾小球性蛋白尿为46 例（38.3%），肾小管性蛋白尿为13 例（10.9%），混合型蛋白尿为61（50.8%）例。与临床病理诊断结果比较，尿蛋白电泳诊断结果可靠。结论：尿液蛋白质电泳简单方便、敏感性高，可于发病早期检测尿蛋白组分变化，明确肾脏损伤部位及程度，为肾脏疾病临床诊断及治疗提供可靠依据。 【关键词】肾脏疾病，尿蛋白，电泳，临床诊断 【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】1671-8725（2014）12-0016-01 肾脏疾病最常见的临床表现之一就是蛋白尿，通过检测患者尿液蛋白质的组分可反映肾脏病变的部位及损伤程度，并作为临床诊断及预防疾病恶化的工具[1]。本文采用十二烷基磺酸钠—琼脂糖凝胶电泳技术（SDS-AGE）对患者非浓缩尿蛋白电泳分析，将尿蛋白按分子量大小分类确定肾脏病变部位，同时结合临床病例诊断结果评价尿液蛋白质电泳在诊断肾脏疾病中的价值。 1 材料与方法 1.1 一般资料选取我院明确诊断的120 例肾脏疾病患者，其中男性57 例，女性63 例，年龄12~75（平均47plusmn;5）岁，对所有患者进行尿液蛋白质电泳。120例患者均经肾病理活检，结果显示：局灶阶段性肾小球硬化18例、弥漫性系膜增生性肾炎48 例、系膜增生性肾小球肾炎25例、肾间质纤维灶性增生29例。 1.2 方法 1.1.1 试剂及仪器试剂：（1）缓冲液PH（7.0plusmn;0.1）、十二烷基磺酸钠（SDS）、琼脂糖浓度为50 g/L的琼脂糖凝胶；（2）缓冲液PH（6.9plusmn;0.1）、浓度为1.0g/L的SDS 缓冲条带；（3）缓冲液PH（7.0plusmn;0.3）、SDS、二巯苏糖醇、溴酚兰稀释液；（4）含15%乙酸、3.0g/L 结晶紫的结晶紫染色液；（5）含3.0%冰醋酸的脱色液；（6）含15%甘油的透明剂；（7）0.9g/dLNaCl。 仪器：法国SEBLA 公司HYDRASYS全自动电泳仪。 1.1.2 实验方法收集10ml 晨尿，1500r/min 离心5min，以黄柳酸进行蛋白定性，若尿蛋白浓度高于2.0g/L，则用0.9g/dLNaCl稀释；取80ul 已处理尿液，用20ulSDS- 溴酚蓝稀释混匀，吸取5ul 滴在凝胶板上，静置扩散10min；于室温，225V，44mA 电泳半小时；取出凝胶板，置于染色槽内，烘干、染色、脱色、固定、扫描、报告结果。 1.1.3 分析标准参照尿蛋白电泳图谱，将尿蛋白按分子量大小分为以下几类，以相对分子量为70kD 的白蛋白为界限：分子量30~70kD 为肾小管蛋白尿；分子量30~120kD 为混合性蛋白尿；分子量仅＞70kD 为肾小球蛋白尿；正常的生理性蛋白尿分子量为66.2kD。 2 结果 2.1 尿蛋白电泳结果120 例患者尿蛋白电泳结果显示：46 例为肾小球蛋白尿，占总数38.3%；61 例为混合性蛋白尿，占总数50.8%；13例为肾小管蛋白尿，占总数10.9%，见表1。 2.2 临床病理诊断对比结果将120 例患者尿蛋白电泳结果与肾活检结果相比，其中局灶阶段性肾小球硬化和系膜增生性肾小球肾炎表现为肾小球蛋白尿和混合性蛋白尿，弥漫性系膜增生性肾炎和肾间质纤维灶性增生主要表现为混合性蛋白尿，部分表现为肾小球蛋白尿和肾小管蛋白尿，见表2。 3 讨论 正常生理条件下，肾小球内系膜具有滤过屏障的作用，因此尿液中蛋白含量甚微。然而当肾脏处于病理状态时，肾小球渗透性增加，白蛋白及分子量更高的蛋白质透过滤膜进入尿中，产生肾小球性蛋白尿，分子量越大，肾小球损伤越严重。而当肾小管损伤时，其重吸收减少，小分子量的蛋白质排入尿液中，排泌量越大，损伤越严重[2]。尿蛋白质电泳可将尿中不同蛋白组分区分开，实验室一般采用SDS电泳技术，该法尿液需浓缩，操作复杂。SDS-AGE电泳技术是一种自动化程序，实验用时短，仅需3h，易于量化，分析简便[3]。 本研究对120例肾脏疾病患者的尿液蛋白质进行SDS-AGE 电泳，参考尿蛋白电泳图谱，结果肾小球性蛋白尿为46 例（38