hnRNP A1的增强型绿色荧光标记及细胞应激定位分析.pdfVIP

522 TianiinMedJ ， Jun2014，Vol42No6 hnRNPA1的增强型绿色荧光标记及细胞应激定位分析 高星杰 宋 娟 葛 林 付 雪 孙晓明 张 纬 何津岩 姚 智 杨 洁 【摘要】 目的 构建包含有核不均一核糖核蛋 白(hnRNP)A1蛋白编码区序列的真核表达质粒pEGFP—c卜 hnRNPA1，并对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的hnRNPA1蛋白进行细胞应激共定位分析。方法 提取HeLa细 胞总RNA，以针对hnRNPA1—3非翻译区的特异性片段为反转录引物，反转录出包含hnRNPA1编码区序列的cDNA， 并以其为模板，降落PCR法扩增出带EcoRI和BamHI双酶切位点的目的基因，利用双酶切法分别酶切 目的基因片 段和线性pEGFP—