间接ELISA鉴别诊断自然感染与免疫接种鸡群禽流感病毒抗体.pdfVIP

其他论文 对于易流行的沿海地区。自然水体要进行必要的日常监测．收集日常数据，为今后的疫 情调查提供参考和对照，以便更快的发现传染源．得到及时的控制。 5．2改善周围的生活环境．提高社会卫生标准． 健全社区水环境，提高健康饮水的标准，在农村，要及时清理粪便垃圾等，对疫区进行 药物灭蝇，改善环境卫生．使用地面水或大口井水，应实施桶水或缸水消毒。反复宣传不喝 生水，不吃生冷食品。过晚或隔餐食品应重新加热，防蝇、灭蝇，饭前便后认真洗手。对厕 所和被病人吐泻物污染的地面、衣物、病人使用的餐具等进行严格消毒。 5．3保护易感人群。使用疫苗免疫 等人发现．在非洲撒哈拉沙漠以南的易感人群口服WC，mS疫苗对控制疫情有良好的效果II…。 我国现行使用的霍乱疫苗是由霍乱弧菌古典型和EL．Tor型蘑体全细胞及霍乱弧菌毒素的重 组亚单位B抗原组成，目前尚无有效预防0139群霍乱弧菌感染的菌苗问世。 6小结 霍乱污染一旦发生立即引起发病．每次污染的发生也并非都应起发病，只有当传播环节 的污染与流行因素有机结合才会触发疫情。Il”因此，做好霍乱的流行病学的调查，是十分 重要的．随着社会和经济的发展，霍乱的传染源、传播途径、流行因素以及暴发流行的表现 形式变得更加复杂，近年来有报道称，01群霍乱弧菌与非01群霍乱弧菌、0139霍乱弧菌的 某些毒性基因可能发生重组，成为新的更强独立的霍乱弧菌。因此加强霍乱的防控措施是势 在必行的。尽管我国在在现场流行病学的调查水平与国外中还存在一些差距，但是随着我国 卫生条件的改善，和生活水平的提高，霍乱疫情将会得到较大的控制和改善。 参考文献略 间接ELISA鉴别诊断自然感染与免疫接种鸡群’ 禽流感病毒抗体 王琰l2。孙建和l¨，陆承平l’2，严亚贤l，捌佩红3，王建3。周锦萍3 (1．上海交通大学农业与生物学院上海20lloo；2．南京农业太学动物医学院南京2l0095) (3．上海市畜牧善医站上海201103)3 擅耍 I目的l通过间接EUSA，在群体水平上．鉴别诊断自然感染与免疫接种鸡群青流感病毒抗体． 入pET．32时-)t构建出能够表选Nsl蛋白的重组表选栽体．将谊栽体导八到大肠杆菌BL2l细胞中，在适 当温度和Ⅱ叮G诱导下表达．采用sDs．PAGE电泳和w吲啪Blot鉴定所表迭的蛋白．并对重组蛋白进行纯 化．利用纯化的重组禽流感Nsl蛋白作为抗原建立间接ELIsA．测定反应的最佳条件．用已建立的问接 EusA，检测禽流感H9N2活毒感染．灭活疫苗克疫的鸡群中的Nsl抗体水平．确定ELIsA阴，阳·|生·临界 值，以夏璃群的最少检测样奉数，以鉴别诊断整个鸡群是否感染禽流毒野毒．【结果】试验所得重组表达产 物为460∞的禽流感病毒Nsl融台蛋白．表速产物经纯化后．获得l-3m∥mL禽流感病毒Nsl融合蛋白． 所建立的EusA．Nsl抗原的最佳包被泉度为40u计nL，抗体的最佳稀释倍数为l：200．酶标二抗的最 佳稀释倍数是l：100∞．抗原抗体最佳反应时闻均为lh，EusA检测结果经统计学分析，H9N2灭活疫 苗接种组与非免疫鸡的自然阴性血清、禽流感H9N2嫡毒感染组血清p∞．05，差异显著，确定ELIsA啊阳 性判定的oD临界值为0．5；检测鸡群血清样本数至少为30份．【姑论】奉方法可用于鉴剐禽流感野毒感染． 关键词青流感病毒；NsI蛋白：重组表逮；间接EuSA；鉴矶诊断 禽流感(Avi锄Illfl岫AD是由正粘病毒科A型流感病毒属中禽流感病毒(Avim ·上海市科技攻关项目(N≥：0439193lo) ”通讯作者：孙建和，Tcl：021．“7鹳734。E．mail：辄njhe@母nLedu．∞ 1124 中国畜牧兽医掌会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 感病毒感染早期可以在细胞核内发现大量NSl蛋白存在。在感染的晚期。Nsl蛋白可以在胞 浆中出现”J．Nsl蛋白可以刺激鸡体产生相应的抗体．但在成熟的病毒颗粒中没有发现该蛋 白．应用灭活疫苗免疫后，在鸡体中不会出现NSl蛋白抗体或出现极低含量的NSl蛋白抗体， 而野毒感染的鸡体内由于存在病毒的繁殖、复制．通常会出现大量NSl蛋白。从而诱导抗体 产生．NSl蛋白相应抗体水平可以作为判定鸡群感染野毒的一个重要标记川。这是本试验建 立间接ELlsA的实验依据…． 传统的血清学诊断禽流感的方法有血凝和血凝抑制试验(HA-}Ⅱ)、琼脂免疫扩散 (AGP)、微量中和以及