USP微生物限度及无菌检验方法1.doc

USP微生物限度及无菌检验方法1 表1. 培养基的生长促进、抑菌、指示性能 检测/培养基 特性 供试菌株 胆汁耐性革兰氏阴性菌的检测 l肠道菌增菌肉汤培养基 生长促进 大肠杆菌 绿脓杆菌 抑制 金黄色葡萄球菌 紫红色胆汁葡萄糖琼脂培养基 生长促进+指示 大肠杆菌 绿脓杆菌 大肠杆菌的检测 麦康凯培养基流体 生长促进 i大肠杆菌 抑制 金黄色葡萄球菌 麦康凯琼脂 生长促进+指示 大肠杆菌 沙门氏菌的检测 氯化镁孔雀绿沙门氏菌富集肉汤培养基 生长促进 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium or Salmonella enterica subsp. enterica serovar abony 抑制 金黄色葡萄球菌 木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂培养基 生长促进+指示 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium or Salmonella enterica subsp. enterica serovar abony 指示 大肠杆菌 绿脓杆菌的检测 十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基 生长促进 绿脓杆菌 抑制 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌的检测 甘露醇氯化钠琼脂培养基 生长促进+指示 金黄色葡萄球菌 抑制 大肠杆菌 梭状芽孢杆菌的检测 梭状芽孢杆菌强化培养基 生长促进 生孢梭菌 哥伦比亚琼脂 生长促进 生孢梭菌 白色念珠菌的检测 （沙氏）葡萄糖肉汤培养基 生长促进 白色念珠菌 （沙氏）葡萄糖琼脂培养基 生长促进+指示 白色念珠菌 定量检测— 选择和再培养—将在样品的制备和预培养项下规定的制备品和/或分别包含0.1克，0.01克，和0.001克（或0.1毫升，0.01毫升，和0.001毫升）该供试品的稀释液，接种于适量的肠道菌增菌肉汤培养基Mossel。在温度30℃至35℃下培养24至48小时。在紫红色胆汁葡萄琼脂培养基的平皿上对培养物进行再次培养。在温度30℃至35℃下培养18至24小时。 说明—菌落的生长构成了阳性结果。记录产生阳性结果的最少量供试品和产生阴性结果的最大量供试品。从表2中大概确定细菌的数量。 表2. 结果的说明 每个供试品数量的结果 每克或每毫升供试品的细菌几率数量 0.1 g or 0.1 mL 0.01 g or 0.01 mL 0.001 g or 0.001 mL + + + 超过103 + + - 小于103并且大于102 + - - 小于102并且大于10 - - - 10 小于10 大肠杆菌 样品的制备和预培养—按在 非无菌产品微生物学检测：微生物计数检查法61章节下的描述，将不少于1克的供试品以1:10稀释来制备样品，并使用10毫升或对应1克或1毫升的数量，接种于适量（按照检查方法的适用性项下的内容来确定）的大豆酪蛋白消化物肉汤培养基，混匀，并在温度30℃至35℃ 下培养18至24小时。 选择和再次培养—摇动容器，转移1毫升大豆酪蛋白消化物肉汤培养基至100毫升的麦康凯（MacConkey）肉汤培养基，并在温度42 ℃至44 ℃ 下培养24至48小时。在温度30至35℃下，于麦康凯（MacConkey）琼脂培养基的平皿上再次培养18至72小时。 说明—菌落的生长表明了大肠杆菌存在的可能性。这需通过鉴别检测来证明。 如果没有菌落存在或如果确认鉴别检测为阴性，则该供试品符合该检测的要求。 沙门氏杆菌 样品的制备和预培养—按照在 非无菌产品微生物学检测：微生物计数检查法61章节下的描述制备供试品，并使用对应不少于10克或10毫升的数量接种于适量（按照检查方法的适用性项下内容来确定）的大豆酪蛋白消化物肉汤培养基，混合，在温度30℃ 至35℃ 下培养18至24小时。 选择和再次培养—转移0.1毫升大豆酪蛋白消化物肉汤培养基至10毫升氯化镁孔雀绿沙门氏菌富集肉汤培养基，并在温度30至35℃之间培养18至24小时。在木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂培养基的平皿内再次培养。在温度30至35℃之间培养18至48小时。 说明—可能存在的沙门氏菌通过生长良好的红色菌落，带有或没有黑色中心来识别。这由鉴定试验来确认。 绿脓杆菌 样品的制备和预培养—按照在 非无菌产品微生物学检测：微生物计数检查法61章节中的描述，将不少于1克的供试品以1:10稀释来制备样品，并使用10毫升或对应1克或1毫升的数量，接种于适量（按照检查方法的适用性项下描述来确定）的大豆酪蛋白消化物肉汤培养基，混匀。当检测贴剂时，通过无菌膜过滤器来过滤对应一贴制备品的样品（见 非无菌产品微生物学检测：微生物计数检查法61章节中样品的制备项下贴剂），并置于1