RNA干扰靶向抑制磷脂酰肌醇3-激酶P85α蛋白表达对结直肠癌细胞周期和细胞凋亡的影响.pdfVIP

．论著· RNA干扰靶向抑制磷脂酰肌醇3一激酶 P85仪蛋白表达对结直肠癌细胞周期 和细胞凋亡的影响 徐学虎孙嫣曾晖 【摘要】 目的探讨RNA干扰靶向抑制磷脂酰肌醇3．激酶(P13K)P85a蛋白表达对结直肠癌 细胞周期与细胞凋亡的影响。方法设计4条shRNA干扰载体及l条阴性对照载体，分别稳定转染 blot筛选出对P13KP85a蛋白抑制效率最高的shRNA干扰片 结直肠癌SW480细胞。采用Westem V．FITC标记法分别检测干扰后SW480细胞周期和细胞凋亡情 段．然后通过PI标记法和Annexin 况。结果转染shRNA／324后，SW480细胞P13KP85a蛋白降低最为显著，抑制率为90％，选择该 干扰片段进行后续实验。干扰组与对照组SW480细胞的G。期细胞数量分别占(62．4±2．7)％和 (51．2+3．5)％：S期细胞数量占(23．9土1．7)％和(34．1±3．4)％；氟尿嘧啶所诱导的细胞凋亡率为