RNA干扰靶向抑制三磷酸甘油醛脱氢酶表达对鱼藤酮所致神经毒性的影响.pdfVIP

卒中与神经疾病2()()9年4月第16卷第2期 ·67· -论 著 ● RNA干扰靶向抑制三磷酸甘油醛脱氢酶 表达对鱼藤酮所致神经毒性的影响 黄金莎郝丽君 熊 念王 涛曹学兵 梁直厚孙圣刚 【摘要】目的研究RNA干扰(RNAi)技术能否有效抑制三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的表达以及 对鱼藤酮所致神经毒性的影响。方法体外化学合成针对GAPDH基因的小干扰RNA(siRNA)，通过脂质 体Lipofectamine20()o瞬时转染后采用实时荧光定量PCR(real—time PCR)和蛋白免疫印迹分析(westem blot)进行干扰效果的鉴定；使用激光共聚焦荧光显微镜观察干扰对鱼藤酮诱导的GAPDH定位和结构改变 的影响；用流式细胞仪检测线粒体膜电位变化。结果 实时荧光定量PcR及蛋白免疫印迹分析显示，化