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实验三黄连中盐酸黄连素的含量测定
薄层板制备
每组制备2块薄层板：
硅胶G:12g
0.3％的羧基纤维素钠(CMC-Na):36ml
实验三
黄连中季铵型总生物碱
的含量测定
一、目的要求
1．掌握用分光光度法测定中药制剂中总生物碱含量。
2．掌握紫外分光光度计的使用方法。
二、基本原理
用超声震荡提取法，将生物碱以盐的形式提取后，用氧化铝作净化剂进行液-固萃取净化处理，使提取液中极性大的干扰组分保留于柱上，小檗碱型生物碱被洗脱，以消除干扰。盐酸小檗碱在345 nm±1 nm处有最大吸收波长，在此波长处测定洗脱液的吸收度，以吸收系数法按盐酸小檗碱（C20H18CLNO4）的吸收系数（E1cm1%）为728计算总生物碱的含量。
三、仪器与试药
1．分光光度计
2．分析天平
3．内径9mm层析柱
4．中性氧化铝、盐酸、甲醇、乙醇
5．黄连药材（市售品）。
2．净化
精密量取上述溶液5ml加于已处理好的氧化铝柱上（玻璃柱内径9mm，中性氧化铝7g，湿法装柱用乙醇约30ml预洗）用乙醇约25ml分次洗脱，收集洗脱液，置50ml量瓶中,用乙醇稀释至刻度(留下次实验用),取1 ml(三份)至25 ml量瓶中,加硫酸（0.05mol/l）稀释至浓度，摇匀。
3．测定法
照分光光度法，在345nm的波长处测定吸收度，按盐酸小檗碱（C20H17NO4·HC1）的吸收系数（E1cm1%）为728计算，即得。本品按干燥品计，含盐酸小檗碱C20H17NO4·HC1)不得少于7.0%。
五、思考题
1．本实验操作中应注意哪些问题？
2．若想证明此实验的可靠性，须做什么实验？
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