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定向基因改造设想 　 限制性内切酶 1.特点：专一性，即识别特定核苷酸序列，在特定的切点切割。 2.来源：主要来自原核生物。 3.结果：产生黏性末端（碱基互补配对）、平末端。 4.举例：大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开形成黏性末端，SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切割形成平末端 。 　 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ 载体 1.作用： 2.种类：质粒、λ噬菌体衍生物和动植物病毒 3.质粒的特点 质粒的特点 细胞染色体（或拟核DNA分子）外能自主复制的小型环状DNA分子； 质粒的存在对宿主细胞无影响； 3.质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 作为运载体必须具备哪些条件？ （二）基因操作的工具 1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3.具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 大肠杆菌的质粒： （二）基因操作的工具 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。复制只能在宿主细胞内成。 1.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键 C 练习 2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 3.有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 B D 练习 * * * * * 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 我国是世界上最大的棉花生产国和消费国，棉花种植面积约占世界的15％ 。据统计，1992年至1996年，因防治棉铃虫等虫害造成农药中毒的有24万余人。其中仅1992年棉农中毒人数就高达7万多人，直接经济损失达100多亿元。于是我国的棉农一气之下改种了抗虫棉。 能杀死棉铃虫的基因来自一种叫做“苏云金芽孢杆菌”的细菌。这种细菌产生的蛋白质叫做晶体蛋白，蛋白本身没有毒性，但由于棉铃虫的胃呈碱性，一旦棉铃虫吃了它，就会在胃中分成两个蛋白，其中一个与胃肠膜特定结合在一起形成穿孔，把棉铃虫毒死。而人和动物的胃则呈酸性，吃后分解成氨基酸，变成了营养物质。 基因工程的产物 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 一、基因工程的概念 原理： 优点： 基因重组 ⑴ 定向改造生物性状 ⑵ 克服远缘杂交不亲和的障碍 ⑶ 育种周期短 基因工程的概念 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 二、基因工程的基本工具 请同学们看书，思考以下问题： 1、基因工程中三种基本工具的作用分 别是什么？ 2、工具酶的作用部位分别在哪？ 3、具备什么条件才能充当“分子运输 车”？ 基因工程培育抗虫棉的简要过程： （一）基因工程示例 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 剪切 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 重组DNA 导入 拼接 表达 （二）基因工程的过程 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 关键步骤二： 关键步骤三： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 抗虫基因进入棉花细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ （二）DNA重组技术的基本工具 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： 分子手术刀—限制性内切酶 分子缝合针—DNA连接酶 分子运输