苏丹红染料的高效液相色谱分析方法研讨.pdfVIP

首届中国中西部地区色谱掌术交流会 2006年8月 苏丹红染料的高效液相色谱分析方法研究 刘勉1，王谢1，赵灿方j， 刘红霞1’2， 张书胜1， 张榕杰3 (1，郑州大学化学系，河南省化学生物与有机化学重点实验室，郑州450052；2．清华大学深圳研究生院，广 长期以来，苏丹红一直被定为化工染料，各国从未把苏丹红作为食品添加剂，也很少研究其食 用的安全性。由于在英国最大的食品制造商第一食品公司生产的沙司中发现了被欧盟禁用的苏丹红 I号色素，由此引发了世界各国对苏丹红在食品中安全性问题的恐慌。苏丹红有一、二、三、四号4 种交体【11。经毒理学研究表明，苏丹红具有致癌性【2】，如果短期内大量食用，则会直接引起死亡，很 多国家都已明令禁止苏丹红用在食品中。因此建立简单、快捷、准确的检测苏丹红染料的方法显得 尤为重要。在我国，国家质检总局和国家标准委于2005年联合发布《食品中苏丹红染料的检测方法 一高效液相色谱法》国家标准，该标准规定了食品中苏丹红系列染料的高效液相色谱测定方法。方 法采用正相吸附和固相萃取原理，一次性去除样品中辣椒色素和番茄色素对食品中苏丹红检测结果 的影响，该方法最低检测限均为10嵋Jkg。此外还有电化学方法131、分光光度法【4】、气相色谱法【5】。 本文研究建立了用乙腈提取，，用乙腈／水为流动相分离分析苏丹红的HPLC分析方法，用于实际样品 测定，结果满意。 1 实验部分 1．1仪器与试剂 采用Waters600高效液相色谱仪和Waters2996二极管阵列检测器；乙睛为色谱纯。分别称取 仿(2mL)溶解，乙睛定容，冬甩 1．2优化的色谱条件 SB HPLC色谱柱：Zorbax 1．0mL／mimPAD波长范围：190-400 nlill检测波长：229nm：进样量：10皿。 1．3样品制备 转移至25mL容量瓶中，加乙睛定容。经0．459m的有机滤膜过滤后待测。 2结果与讨论 2．1苏丹红I和苏丹红IVHPLC条件的确定及其标准曲线的绘制 实验发现在选择流动相时，采用100％的甲醇作为流动相，在苏丹l号处有干扰，致使添加回 收率偏高。 而采用乙腈：水为95：5(v／v)作为流动相，可使杂质与待测物明显分离，且样品运行保 297 -Ig．m中团中西部地区色谱掌术交流会 2006年8月 持在很短的时间之内，保证了可连续测定大量样品，从而获得了优化的色谱条件(2．2)。 pg／mL；苏丹红Ⅳ 配制苏丹红I标准溶液的浓度分别为：39．6、3．96、0．396、0．0792、0．01584 得了面积一浓度线性回归方程： 苏丹红I： y=96078x-7934(n=5，R2=0．9999) ． 苏丹红IV-y48669x_60l(n=5，R2=o．9972) 、 结果表明，在所选的浓度范围内苏丹红I、苏丹红Ⅳ的峰面积和浓度呈现良好的线性关系。按 3倍噪音计算其最低检出限，苏丹红I、苏丹红Ⅳ的最低检出限分别是O．00528pg／mL和 一 O．0792pg／mL·， ， 2．2方法的重现性 相对标准偏差分别小于0．5％和0．9％。 2．3回收率 取396pg／mL的苏丹红I、苏丹红Ⅳ标准溶液各303ttL于50 mL容量瓶中，加乙睛定容； 的辣椒酱，加20mL乙睛．超声震荡50min．过滤后将滤液转移至25 经0．45ttm的有机滤膜过滤后待测。 在优化的色谱条件下，取上述溶液进行I-iPLC分析测定。根据苏丹红I、苏丹红Ⅳ的保留时间 确定其出峰位置，再由峰面积和回归曲线方程计算出各自相应的浓度，并计算