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实验一、质粒DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳
;;;一、实验目的 ;质粒按复制方式分为两种类型:
松弛型质粒 20~200个拷贝 /细胞
严紧型质粒 1~2个拷贝 /细胞;由pUC18载体改建而成,在pUC18载体的MCS处的Xba?I和Sal?I识别位点之间插入了EcoR?V识别位点,用EcoR?V进行酶切反应后,再在两侧的3'端添加“T”而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有PCR?产物的3'末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。; ;三、仪器、材料与试剂 ;Solution I
50mmol/L 葡萄糖
25mmol/L Tris·HCl(pH8.0)
10 mmol/L EDTA
;Solution II
0.4mol/LNaOH,2%SDS, 用前等体积混合;;;四、实验步骤;一、实验目的;;;三、仪器、材料与试剂; (二)试剂 ;;;五、实验结果;五.问题与讨论:
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