中度嗜盐菌产木聚糖酶发酵条件的研究.pdf

氨基酸和生物资源 2011，33(1)：35～38 AminoAcids＆BioticResources 中度嗜盐菌产木聚糖酶发酵条件的研究 韩秋菊，高 飞 (辽宁石油化工大学环境与生物工程学院，辽宁抚顺 113001) 摘要：中度嗜盐菌在盐碱环境下生长繁殖，其产生的木聚糖酶也同样具有在盐碱环境下发挥作用的特性。本文对一株中 度嗜盐菌的产木聚糖酶活性进行了初步研究。研究包括氮源、液体种子接种量 、培养温度、pH值、培养时间等因素对该菌株产 木聚糖酶能力的影响。结果表明，最佳培养氮源为蛋白胨 ；最佳产生木聚糖酶的发酵条件是液体种子接种量为6％，温度为 35℃，pH值7，培养时间为4d。 关键词：中度嗜盐菌；木聚糖酶；酶活力 中图分类号：Q814 文献标识码：A 文章编号：1006—8376(2011)O1—0035—04 中度嗜盐菌 (moderatelyhalophilicbacteria)是 本研究利用 中度嗜盐菌生产木聚糖酶，该酶在 指一类在盐浓度 3％～15％之间有最佳生长能力的 盐碱性条件下仍能保持较高的活力。这种耐盐碱的 极端微生物类群。中度嗜盐菌分布极其广泛，在盐 特性可以有效弥补很多其他途径获得的木聚糖酶在 湖、海洋等盐水环境，盐碱地、盐池等盐土环境以及 盐碱环境下的缺陷，因而具有更加广泛的应用开发 盐渍发酵食品等人工环境都能够被发现 。中度 价值。本文对影响该菌株产生木聚糖酶的各种因素 嗜盐菌的研究潜力是非常巨大的。比如，在造纸工 进行了有针对性的研究。 业、食品工业以及环境污水处理方面它 已被广泛应 用；它产生的生物表面活性剂、多聚糖类物质能够在 1 材料与方法 石油回收和生物修复中发挥重要作用；利用其细胞 1．1 实验菌株 内积累的多种类相容性溶质可以作为生物大分子稳 中度嗜盐菌，辽宁石油化工大学生物工程教研 定剂以及抗冻剂等。另外，中度嗜盐菌在生物技术 室提供。 ． 中还有很多潜在的应用价值等待开发 J。 1．2 培养基 木聚糖是植物细胞壁的主要成分之一，属于非 嗜盐菌培养基：酪蛋 白水解物5％ ，酵母粉0．5％， 淀粉多糖，是一种广泛存在于植物中的半纤维素。 M O4 ·7H2O0．2％ ，NaC110％ ，K2HPO41％。 作为分解木聚糖的专一降解酶，木聚糖酶在饲料、食 发酵培养基 ：酪蛋 白水解物0．075％；酵母提取 品、纺织、造纸等行业有着广泛的应用前景 。目 物0．1％，柠檬酸钠 0．3％，MgSO ·7H202％，KC1 前发现多种微生物可以产生木聚糖酶，研究较多的 0．2％，FeSO0．005％，NaC110％，麸皮5％。 是丝状真菌，如木霉属、曲霉属等；也有少数细菌产 1．3 酶活力的测定 木聚糖酶，这其 中就包括中度嗜盐菌。现有木聚糖 1．3．1木糖标准 曲线的制备 酶多为酸性或者中性，在某些高pH条件下(比如纸 制备 1g·L 的木糖标准溶液。取 7支试管， 浆漂白等)的应用会受到很大制约 J。 分别按表 1加入试剂： 表 1 木糖标准溶液配制 将各管溶液混合均匀后，沸水浴5min，取出后 冷水冷却到室温，加蒸馏水定容至25mL，蒸馏水做 空白对照。用分光光度计在波长为540nm处测OD 收稿 日期：2010—11—16 作者简介 韩秋菊，女 (1979一)讲师 值 ，绘制木糖标准曲线(如图1)． - 36 · 韩秋菊等： 中度嗜盐菌产木聚糖酶发酵条件的研究 O