固定化内切型肝素酶的研究.PDFVIP

卷 期 !! 微 生 物 学 报 ’( )!! 0’ ) 年 月 #$$! %$ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,’-./ #$$! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 固定化内切型肝素酶的研究 钞亚鹏 徐冠珠 程秀兰 钱世钧 （中国科学院微生物研究所 北京 %$$$=$ ） 摘 要：将提纯的一种内切型肝素酶固定于聚酯载体上，固定化效率达 。酶活力在 为 左右时表现最 2= N=O LP 2 N 高，并且在此条件下固定化酶的稳定性最好。最适反应温度为!$Q 。热稳定性试验表明，固定化酶的稳定性较差。 固定化酶的使用半衰期比游离酶延长 倍。固定化酶催化肝素底物反应的 值约为 而游离酶的 ! N! ! ? N! A’(9 R ! ! 值约为2%N# A’(9 R。固定化酶可以同时作用于肝素和硫酸乙酰肝素，而对硫酸软骨素没有催化能力。肝素经降 ! 解后，产生一定量的非硫酸化或低硫酸化的二糖和不同聚合度的寡糖混合物。 关键词：肝素酶，固定化肝素酶，制备，性质 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） S?1? T $$$%7#$? #$$! $7$=?7$1 肝素酶是能够裂解肝素和硫酸乙酰肝素的一类酶，在临 试剂有限公司，硫酸乙酰肝素，肝素二糖对照和硫酸软骨素 床和医药行业中有重要的应用。它已经被用来清除血液中 系4BVA; 产品，其余试剂为国产分析纯。2W57紫外可见分 的肝素，还具有抑制新生血管的生成，促进伤口愈合等多种 光光度计（上海第三分析仪器厂），高效液相色谱仪X;,./E 生物学活性；而用肝素酶降解肝素产生的低分子量肝素作为 （ 公司），分析型和半制备型阴离子高效液相色谱 $$@ X;,./E 药物在保持肝素的生物活性的同时，能减少肝素使用中产生 柱（大连伊利特公司）。 ［ ］ 的副作用，因而具有明显的优势% U 1 。肝素酶还是用于肝素 ! # 肝素酶活力测定 ［］ 和硫酸乙酰肝素精细结构分析的重要工具! 。 参照文献［］进行。将 适当浓度酶液的 $ N %AR #$AA’(9 R 自然界中肝素酶来源比较稀少，主要存在于肝素黄杆 磷酸钠缓冲液（