螺旋藻多糖标准品的制备及其性质结构的研究.pdf

摘 要 本论文主要论述了从固定产地，固定采收期的钝顶螺旋藻中 提取螺旋藻多糖 (PSP)标准品的方法的研究，对测定螺旋藻多糖 标准品纯度的分子排阻高效液相色谱法进行了适用性考查。并且 针对制备出的纯度大于98%的螺旋藻多糖标准品进行了性质结构 的初步研究。 通过热碱水提取法提取的PSP粗多糖，酸碱等电点法除去蛋 白质后，经过两次乙醇沉淀，CTAB络合，大孔树脂吸附后得到PSP 精品，再经过不同的分离介质分离后，得到纯度大于99%PSP标 准品。 对使用分子排阻高效液相色谱法测定PSP样品的纯度的方法 进行适用性考查，最后确定应用超纯水作为展开系统，从而排除 了展开剂中含有的无机盐对于PSP样品纯度检测的负影响。 对于PSP性质结构的研究表明，PSP为为硫酸酷化酸性杂多 糖，分子量约为24万，糖含量56.4%，含蛋白质1.26%，硫酸 根 (均为N-S0,，一)4.63%，糖醛酸24.18%，氨基葡萄糖17.6%。 高效液相色谱及气相色谱分析其单糖组成为CH,Rha,Rha,Rib, Glc 及 Gal一Ac(摩尔LL为 1.23:2.07:0.52:1:1.14)， 氨基酸分析表明其中含 11种氨基酸，与肤链的连接方式为 Glycan-N-Asn，特异性酶降解显示糖昔键为0一型，紫外图谱显 示在280nm及260nm处无吸收，红外图谱显示具多糖的特征吸收。 根据高碘酸氧化及Smiths降解、部分酸水解以及GC-MS结果综合 分析，该多糖主链部分以1--3,1--4键连接为主，还有少量1-6 键连接，支链为12键连接。 关键词:螺旋藻多糖;标准品;纯度检测;性质结构分析 Abstract: Themainpurposeofdissertation istodeeplyresearch purification ,structure and property of Spirulina Platensis polysaccharide(PSP)fromSpirulinaPlatensisoffixedproducingarea anddate,whichispurerthan98%.Wealsoexaminedtheapplicability ofhighperformancegelpermeationchromatographywhichisusedto mensuratethecontentofPSP. WedistilledPSPprimalsample加mSpirulinaPlatensispowder inhotandalkalescentwater.ThenthePSPsampleisseparatedbytwice ethanoldeposition,CTABcomplexingandresinadsorptionafter eliminatingtheproteinsbyregulatingpH.WecouldgetPSP sample,whichispurerthan99%,purifiedbydifferentstationary phases. The applicability ofhigh performance gelpermeation chromatographywhichisusedtomensuratethecontentofPSPwas examinedtoensurethepurewaterasthemobilephasesoastoremove theinfluenceofsaltinmobilephase. PSPisasulfateheterpolysaccharidewhosemeanMwisabove 24,000,withthecontentofsaccharid56.4%,protein 1.26 ， GlucuronicAcid 24.2% ，vitriolicgroup4.63%，Glucosamine 17.6%.PSPisfoundtobecomposedofCH3-Rha,Rha,Rib,Glc and Gal-Ac inthemolarratio1.23:2.07:0.52:1:1.14.Italso contains11kindsofaminoacid.Thesaccharideconnectswithpeptide throughGlycan-N-Asn.Enzymedegradationrevealedtheg